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彭彭LL新蟲 (初入文壇)
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[求助]
定磷法檢測(cè)磷脂濃度？
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有無人做過定磷法檢測(cè)磷脂濃度的？問題請(qǐng)教，本人新手 步驟： 鉬酸銨溶液：取220mg溶于75ml純水中，緩慢加入200ul濃硫酸，定容至100ml。 Fiske-Subbarow溶液：取亞硫酸氫鈉15g、亞硫酸鈉0.5g，溶于100ml純水中，加入1-氨基-2-萘酚-4-磺酸0.25g，在通風(fēng)櫥中40℃水浴避光電磁攪拌1.0-2.0h。室溫下，避光靜置過夜，濾除不溶物，儲(chǔ)存于棕色試劑瓶中備用。 磷標(biāo)準(zhǔn)液（1mmol/L）：精確秤取無水磷酸氫二鈉14.2mg，溶于純水，定容至100ml。 樣品制備：待測(cè)樣本或標(biāo)準(zhǔn)品100ul，加入0.5ml 5M H2SO4 消化至無機(jī)磷酸鹽 180℃孵育2-3小時(shí)。100ul 30% H2O2 烤箱1.5h孵育。 加入4.6ml 0.22%鉬酸銨和0.2ml的Fiske-Subbarow溶液 沸水浴中7min，冰水浴中快速冷卻，830nm吸光度測(cè)定吸光度。 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)定待測(cè)樣本濃度 這個(gè)過程對(duì)不？步驟中有什么需要注意的部分？尤其是180℃加入步驟，實(shí)驗(yàn)室沒有電爐或者消化爐等，油浴可以嗎？還有硫酸加熱中，看在通風(fēng)廚中進(jìn)行，消化步驟中有危險(xiǎn)不？ 做過的人給指點(diǎn)下 |
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