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xinxin8739新蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于人igG的ELISA測試
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大家好,因為跨學(xué)科,所以我有些關(guān)于人igG的ELISA測試不太懂的地方,想請教下各位。 我是想構(gòu)建雙抗體夾心免疫測定人igG的電化學(xué)免疫傳感器。我把human igG(higG)作為抗原,另外需要再購買兩種抗higG的抗體。我不知道該如何選擇,才能保證針對的higG的表位不同。 (1)如果用不同種屬的,是不是就一定能保證表位不同呢? (2)該如何購買相應(yīng)的兩邊的抗體?我的一抗和二抗都要求是unconjugated。如果是試劑盒,抗體都是已經(jīng)標(biāo)記好的,有的一抗已經(jīng)被包被上去了。我需要標(biāo)記上自己的標(biāo)記物,因此就沒法用。而且試劑盒中,往往都不會告訴你用的一抗 二抗是什么種屬的,專屬性是怎樣,我怎樣才能買到配套的呢? (3)關(guān)于人igG,如果把它作為抗體來看,是不是包含針對不同病毒抗原的igG,它們的vH,vL不同,其他部位都相同,是嗎?就是說我買來的higG protein實際上是針對不同抗原的igG? (4) 那樣,我買的anti-higG也只可能是針對higG的FC區(qū)具有特異性,才可以測全? (5)有的文獻(xiàn)里我也看到了(Fab-specific anti-higG),那這個表述是指代它的抗體是針對higG的Fab區(qū)嗎?higG那個區(qū)不是可變的嗎?怎么測全啊 (6)我也看到有的介紹里提到,間接法測試higG,用抗原包被板子,然后加入血清或標(biāo)樣,然后加入酶標(biāo)結(jié)合物。我想問問間接法測試出的higG是不是就同我要做的雙抗體夾心不同,它只是針對一種higG,我是針對所有的higG呢。 上述問題困擾我很久了,我知道自己知識欠缺太多,如果有老師同學(xué)能夠解惑,會非常感激。 |
新蟲 (小有名氣)
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