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xinxin8739新蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于人igG的ELISA測試
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大家好，因?yàn)榭鐚W(xué)科，所以我有些關(guān)于人igG的ELISA測試不太懂的地方，想請教下各位。 我是想構(gòu)建雙抗體夾心免疫測定人igG的電化學(xué)免疫傳感器。我把human igG（higG）作為抗原，另外需要再購買兩種抗higG的抗體。我不知道該如何選擇，才能保證針對的higG的表位不同。 （1）如果用不同種屬的，是不是就一定能保證表位不同呢？ （2）該如何購買相應(yīng)的兩邊的抗體？我的一抗和二抗都要求是unconjugated。如果是試劑盒，抗體都是已經(jīng)標(biāo)記好的，有的一抗已經(jīng)被包被上去了。我需要標(biāo)記上自己的標(biāo)記物，因此就沒法用。而且試劑盒中，往往都不會(huì)告訴你用的一抗 二抗是什么種屬的,專屬性是怎樣，我怎樣才能買到配套的呢？ （3）關(guān)于人igG，如果把它作為抗體來看,是不是包含針對不同病毒抗原的igG，它們的vH,vL不同，其他部位都相同，是嗎？就是說我買來的higG protein實(shí)際上是針對不同抗原的igG? (4) 那樣，我買的anti-higG也只可能是針對higG的FC區(qū)具有特異性，才可以測全？ （5）有的文獻(xiàn)里我也看到了（Fab-specific anti-higG）,那這個(gè)表述是指代它的抗體是針對higG的Fab區(qū)嗎？higG那個(gè)區(qū)不是可變的嗎？怎么測全啊 （6）我也看到有的介紹里提到，間接法測試higG，用抗原包被板子，然后加入血清或標(biāo)樣，然后加入酶標(biāo)結(jié)合物。我想問問間接法測試出的higG是不是就同我要做的雙抗體夾心不同，它只是針對一種higG，我是針對所有的higG呢。 上述問題困擾我很久了，我知道自己知識(shí)欠缺太多，如果有老師同學(xué)能夠解惑，會(huì)非常感激。  |
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2樓2016-12-09 23:41:13
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