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[求助]
請教一個關于葡聚糖凝膠純化蛋白的問題
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我自己表達的蛋白，分子量80KD左右，先用NI柱純化了一下，下面準備酶切掉N端的一個標簽，切完后651個氨基酸分子量估計70KD多一點而的樣子，準備把酶切后直接上葡聚糖凝膠柱純化，問題是現(xiàn)在實驗室有的填料是G-75,分離范圍是3kd到80kd,我的分子量有些頂著他的上限了，是不是需要換G-100之類的填料？也就是說對于填料的選擇跟自己的目標分子量之間的關系大概是什么樣子的，謝謝？ 另外我酶切下來的片段似乎不到10kd,然后用的酶是凝血酶，大概30多KD,應該不會影響我分離目標蛋白吧，謝謝啦 |
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2樓2016-11-18 21:50:49
3樓2016-11-20 12:37:17
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柱子用superdex200,正常情況下酶和標簽不影響，但是如果酶切不完全或標簽和蛋白折疊到一起去就不好說了。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
cpu104274樓2016-11-20 13:20:27
5樓2016-11-20 21:07:53
6樓2016-11-20 21:35:20
7樓2016-11-20 21:59:39
8樓2016-11-20 22:04:36
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