 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 5255 | 回復(fù): 17 | |||
ljf0814銅蟲 (初入文壇)
|
[交流]
絕對定量標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)粒稀釋問題求助！ 已有6人參與
|
||
| 初次接觸絕對定量PCR，要用質(zhì)粒做標(biāo)準(zhǔn)品，做標(biāo)準(zhǔn)曲線。經(jīng)計(jì)算后我的提取的質(zhì)�？截悢�(shù)為79205720169/ul，老師讓我把質(zhì)粒稀釋成10的8次方個(gè)拷貝/ul到10個(gè)拷貝/ul，8個(gè)梯度，而且要很精確很，一個(gè)都不能差。我想了一下，感覺實(shí)在做不到那么精確，請問這樣該如何稀釋？謝謝各位大神！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有286人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
peitaokong
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 70 (初中生)
- 金幣: 619.5
- 散金: 12
- 紅花: 13
- 帖子: 192
- 在線: 55小時(shí)
- 蟲號: 1961265
- 注冊: 2012-08-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物生理與生化
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
|
絕對定量，標(biāo)準(zhǔn)品確實(shí)需要精確稀釋，因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)品是用來構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，用來計(jì)算拷貝數(shù)的，肯定要準(zhǔn)。首先你要換算成科學(xué)計(jì)算法，你這個(gè)是79.2*1E9(10的九次方的意思）,然后稀釋79.2倍，取5微升質(zhì)粒，加391微升TE buffer(如果用水的話穩(wěn)定性很差），這就變成了1*1E9（10的九次方）。然后你取5微升質(zhì)粒，加入45微升的TE buffer，稀釋成1*1E8（10的八次方）。照此稀釋。 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品過程，一定要記著加完后，讓溶液靜置五分鐘，分子充分運(yùn)動(dòng)混合均一，一定要帶手套，找一個(gè)相對安靜沒有認(rèn)來回走動(dòng)的地方，來做這個(gè)事情，每稀釋一個(gè)濃度注意換一次手套。希望能夠幫助你。 |
11樓2016-12-14 20:10:42
許彥
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 3573.8
- 紅花: 7
- 帖子: 437
- 在線: 69小時(shí)
- 蟲號: 3925990
- 注冊: 2015-06-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物技術(shù)藥物
4樓2016-12-08 22:14:51
許彥
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 3573.8
- 紅花: 7
- 帖子: 437
- 在線: 69小時(shí)
- 蟲號: 3925990
- 注冊: 2015-06-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物技術(shù)藥物
★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-12-09 07:31:18
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2016-12-09 07:31:18
|
差不多就行。個(gè)人建議10ul+90ul這樣稀釋，震蕩，離心。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-12-08 17:12:18
ljf0814
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 285.5
- 散金: 14
- 帖子: 27
- 在線: 42小時(shí)
- 蟲號: 4174225
- 注冊: 2015-10-26
- 專業(yè): 生物化學(xué)
10樓2016-12-12 10:26:30
peitaokong
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 70 (初中生)
- 金幣: 619.5
- 散金: 12
- 紅花: 13
- 帖子: 192
- 在線: 55小時(shí)
- 蟲號: 1961265
- 注冊: 2012-08-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物生理與生化
15樓2016-12-15 08:03:46
ljf0814
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 285.5
- 散金: 14
- 帖子: 27
- 在線: 42小時(shí)
- 蟲號: 4174225
- 注冊: 2015-10-26
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2016-12-08 17:18:36
ljf0814
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 285.5
- 散金: 14
- 帖子: 27
- 在線: 42小時(shí)
- 蟲號: 4174225
- 注冊: 2015-10-26
- 專業(yè): 生物化學(xué)
5樓2016-12-08 22:41:07
許彥
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 3573.8
- 紅花: 7
- 帖子: 437
- 在線: 69小時(shí)
- 蟲號: 3925990
- 注冊: 2015-06-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物技術(shù)藥物
6樓2016-12-09 05:41:42
xiaoxie2020
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 612.1
- 帖子: 11
- 在線: 5.4小時(shí)
- 蟲號: 4050592
- 注冊: 2015-09-03
- 性別: MM
- 專業(yè): 免疫學(xué)
7樓2016-12-09 07:54:41
ljf0814
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 285.5
- 散金: 14
- 帖子: 27
- 在線: 42小時(shí)
- 蟲號: 4174225
- 注冊: 2015-10-26
- 專業(yè): 生物化學(xué)
8樓2016-12-09 12:11:10
mochenmi
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 1504.3
- 散金: 29
- 帖子: 221
- 在線: 48.7小時(shí)
- 蟲號: 1966704
- 注冊: 2012-09-01
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
|
樓主問一下，質(zhì)�？截悢�(shù)是怎么算的？能直接測嘛？我只知道測質(zhì)粒的濃度，單位是ng\ul 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
9樓2016-12-11 23:47:59
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 ljf0814 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +8 | 何潤采123 2026-03-18 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿武漢理工材料工程專碩調(diào)劑 +4 | Doleres 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | ydfyh 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑 +3 | 墨墨漠 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +3 | 小材化本科 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0854可跨調(diào)劑，一作一項(xiàng)核心論文五項(xiàng)專利，省、國級證書40+數(shù)一英一287 +8 | 小李0854 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +6 | 困于星晨 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +9 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | Zz版 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | 太陽花天天開心 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +5 | 時(shí)間點(diǎn) 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +4 | 諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)覬?/a> 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請] 現(xiàn)在如何回避去年的某一個(gè)專家，不知道名字 +3 | zk200107 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工301求調(diào)劑 +5 | 奕束光 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +3 | 小匕仔汁 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | 崔wj 2026-03-12 | 4/200 |
|