 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 7099 | 回復(fù): 7 | |||
[交流]
轉(zhuǎn)染的時候，質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染試劑加的順序 已有6人參與
|
|
轉(zhuǎn)染的時候，是質(zhì)粒加到轉(zhuǎn)染試劑(如lipo)還是轉(zhuǎn)染試劑加到質(zhì)粒中，因為在用fermentas的時候，是直接混合，沒有分管稀釋的，所以轉(zhuǎn)染試劑先加就不用換槍頭，如果質(zhì)粒先加就需要換槍頭。但是加的順序?qū)D(zhuǎn)染的影響還是要考慮的。。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有273人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
2樓2017-01-22 15:55:16
engreen2016
禁蟲 (正式寫手)
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
3樓2017-04-28 10:57:16
4樓2018-09-20 15:18:26
5樓2018-12-17 09:24:06
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
|
我們一般都是直接按照說明書操作的，方法步驟如下: 貼壁/懸浮細胞瞬時轉(zhuǎn)染操作流程(以24孔板轉(zhuǎn)染為例) A. 細胞接種: 1.轉(zhuǎn)染前24小時左右對細胞進行轉(zhuǎn)接，接種密度約為每孔0.3~1×105個細胞； 2.過夜培養(yǎng)。 B. DeofectEU /DNA復(fù)合物包裝(該步完成后應(yīng)立即轉(zhuǎn)染): 1.在1.5 ml無菌離心管中加入50μl無血清培養(yǎng)基，并添加適量的轉(zhuǎn)染試劑(2~5μl/μg DNA，參見下表) 。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5~10分鐘。 2.在1.5 ml無菌離心管中加入50μl無血清培養(yǎng)基，并添加適量的DNA (0.8~1μgDNA/孔， 參見附表)。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5~10分鐘。 3.將DeofectEU-培養(yǎng)基混合物滴加至DNA-培養(yǎng)基混合物中，用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15~20分鐘后，立即轉(zhuǎn)染。注意： DeofectEU-培養(yǎng)基混合物和DNA-培養(yǎng)基混合物的混合次序非常重要，切勿顛倒。 C.轉(zhuǎn)染: 注意：DeofectEU 在完全培養(yǎng)基中(基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加血清)具有最高的轉(zhuǎn)染效率，因此轉(zhuǎn)染前后不需要換成無血清培養(yǎng)基。 1.如特殊情況，可在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基，以防轉(zhuǎn)染后孵育階段細胞密度太大、營養(yǎng)不足導(dǎo)致的細胞死亡。 2.將步驟B制備的復(fù)合物滴加至培養(yǎng)基中。輕輕晃動培養(yǎng)皿以使復(fù)合物均勻分布。 3.過夜培養(yǎng)24~48小時。 4.注意:如果轉(zhuǎn)染后需要更換新鮮培養(yǎng)基，請于加入DeofectEU /DNA復(fù)合物12~24小時后進行。培養(yǎng)基更換后，孵育24~48小時后再進行后續(xù)實驗。 5.收獲細胞，進行后續(xù)實驗。 |
6樓2019-03-11 14:43:10
Explor
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 1554.8
- 散金: 88
- 紅花: 2
- 帖子: 775
- 在線: 168.8小時
- 蟲號: 8160133
- 注冊: 2018-03-05
- 專業(yè): 生物化學
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
| 百代的RFectSP Plasmid 使用非常方便，先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合，再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細胞中，血清不影響其轉(zhuǎn)染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液。具體你可以參照說明書，或者咨詢www.biodai.com.cn看看。 |
7樓2019-10-29 13:56:14
Explor
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 1554.8
- 散金: 88
- 紅花: 2
- 帖子: 775
- 在線: 168.8小時
- 蟲號: 8160133
- 注冊: 2018-03-05
- 專業(yè): 生物化學
8樓2019-10-29 15:23:02
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 華西Aspirin 的主題更新
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +6 | yy要上岸呀 2026-03-17 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +4 | △小透明* 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
[考研] 085600材料與化工 +4 | 安全上岸！ 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 08工科 320總分 求調(diào)劑 +4 | 梨花珞晚風 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京大學，080500材料科學與工程，調(diào)劑 +4 | Jy? 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +7 | 邱gl 2026-03-11 | 8/400 |
|
|
|
[論文投稿] 有沒有大佬發(fā)小論文能帶我個二作 +3 | 增銳漏人 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +5 | 26研0 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[教師之家] 焦慮 +7 | 水冰月月野兔 2026-03-13 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 080500，材料學碩302分求調(diào)劑學校 +4 | 初識可樂 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料工程327求調(diào)劑 +3 | xiaohe12w 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 337一志愿華南理工0805材料求調(diào)劑 +7 | mysdl 2026-03-11 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑 +4 | 快樂的香蕉 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 085600英一數(shù)二總分302 前三科235 精通機器學習 一志愿哈工大 +4 | 林yaxin 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 315求調(diào)劑 +9 | 小羊小羊_ 2026-03-11 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +5 | 超級伊昂大王 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +8 | 困于星晨 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 270求調(diào)劑 085600材料與化工專碩 +3 | YXCT 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 152697 2026-03-12 | 4/200 |
|