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huangts123至尊木蟲 (著名寫手)
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[求助]
同一蛋白在HPLC測的純度>99%，而UPLC上出現(xiàn)峰裂分 已有1人參與
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各位大神，下圖是一個分子量約為80kD的蛋白，HPLC上檢測的純度為99.40%，峰型正常；UPLC上為什么會裂分? ①進樣量為10ul，濃度約為0.81mg/ml，樣品過載？ ②蛋白是用注射用水溶的，會是溶樣的溶劑效應(yīng)導(dǎo)致的？③還是因為蛋白本身的原因！請各位大神多多指教，謝謝！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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huangts123: 金幣+10, ★★★很有幫助 2017-02-21 18:33:10
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1. 你的強洗和弱洗用的什么？有沒有放反了？ 2. 如果懷疑過載了 這個是最好解決的，可以做幾個稀釋樣品試一下就知道了，分別稀釋10， 100， 1000等。直至不出現(xiàn)分叉 3. 溶劑效應(yīng)的話可以用其實流動相組成來溶解樣品 本身原因應(yīng)該不太可能 畢竟你咋HPLC上出的峰沒有分叉，當然不同儀器間出現(xiàn)差異也是可以理解的 |
3樓2017-02-21 17:09:38
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