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huangts123至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[求助]
同一蛋白在HPLC測(cè)的純度>99%，而UPLC上出現(xiàn)峰裂分 已有1人參與
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各位大神，下圖是一個(gè)分子量約為80kD的蛋白，HPLC上檢測(cè)的純度為99.40%，峰型正常；UPLC上為什么會(huì)裂分? ①進(jìn)樣量為10ul，濃度約為0.81mg/ml，樣品過(guò)載？ ②蛋白是用注射用水溶的，會(huì)是溶樣的溶劑效應(yīng)導(dǎo)致的？③還是因?yàn)榈鞍妆旧淼脑�！�?qǐng)各位大神多多指教，謝謝！ |
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superyeast
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8樓2017-02-21 22:52:13
llx5262187 
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2樓2017-02-21 16:06:20
llw1986
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
huangts123: 金幣+10, ★★★很有幫助 2017-02-21 18:33:10
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
huangts123: 金幣+10, ★★★很有幫助 2017-02-21 18:33:10
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1. 你的強(qiáng)洗和弱洗用的什么？有沒(méi)有放反了？ 2. 如果懷疑過(guò)載了 這個(gè)是最好解決的，可以做幾個(gè)稀釋樣品試一下就知道了，分別稀釋10， 100， 1000等。直至不出現(xiàn)分叉 3. 溶劑效應(yīng)的話可以用其實(shí)流動(dòng)相組成來(lái)溶解樣品 本身原因應(yīng)該不太可能 畢竟你咋HPLC上出的峰沒(méi)有分叉，當(dāng)然不同儀器間出現(xiàn)差異也是可以理解的 |
3樓2017-02-21 17:09:38
huangts123
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4樓2017-02-21 17:24:12
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