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三對引物同時使用，正向引物之間以及反向引物之間有重疊（不是巢式PCR）,目的何在？
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三對引物同時使用，正向引物之間以及反向引物之間有重疊（不是巢式PCR）,目的何在？ 針對一個病毒的靶基因的比較保守的區(qū)域，有人針對該區(qū)域設計引物進行實時PCR以檢測該病毒，但是他同時使用了三對引物，并且正向引物之間以及反向引物之間均有幾個堿基重疊（不是巢式PCR）,目的何在？ 對于上述做法，我的個人考慮是這樣的，請大家?guī)兔χ刚嚎紤]到雖然是針對保守區(qū)域擴增，但是難免還是會有個別堿基突變，所以作者設計三對略有重疊的引物進行擴增，以增大包含該病毒的樣品的陽性檢出率？這樣做以增大陽性樣本的檢出率理論上可行嗎？如果理論上可行的話，不知道這種做法是否普遍？謝謝大家。 |
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- 專業(yè): 黏膜免疫學
2樓2017-03-15 16:47:10
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是重疊延伸PCR，最終的結果是三對引物克隆序列以重復區(qū)為了解點全連在一起，成為一條長連，實際就是一次把三個不同位置的目的片段克隆出來，一般這三個應該是共同完成一個任務的，但是序列不在一起 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-03-16 06:08:37
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