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趙晴兒新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
克基因片段退火怎么55度若克不出來(lái),其他溫度是不是也克不出來(lái)... 已有7人參與
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克基因片段退火怎么55度若克不出來(lái),其他溫度是不是也克不出來(lái)? 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
新蟲(chóng) (初入文壇)
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫手)
版主 (著名寫手)

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這個(gè)說(shuō)法肯定不對(duì),PCR受多方面因素的影響。首先可以嘗試溫度梯度,50-60度。如果不是退火的原因,那就檢查下你的基因片段是不是高GC含量的,如果是的話,你可以選擇擴(kuò)增高GC含量的酶和相應(yīng)的buffer 。 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
新蟲(chóng) (正式寫手)
木蟲(chóng) (正式寫手)

新蟲(chóng) (初入文壇)
金蟲(chóng) (著名寫手)
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為什么退火溫度一定是55℃,這個(gè)需要計(jì)算啊,有一定幅度,你可以多試幾次,溫度梯度;此外,擴(kuò)不出來(lái),也不一定是退火溫度,也可能是鎂離子濃度,模板,酶等的問(wèn)題 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |

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