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克基因片段退火怎么55度若克不出來,其他溫度是不是也克不出來... 已有7人參與
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克基因片段退火怎么55度若克不出來,其他溫度是不是也克不出來? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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6樓2017-03-15 19:26:50
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5樓2017-03-15 19:16:45
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西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2017-03-17 07:48:54
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2017-03-17 07:48:54
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這個說法肯定不對，PCR受多方面因素的影響。首先可以嘗試溫度梯度，50-60度。如果不是退火的原因，那就檢查下你的基因片段是不是高GC含量的，如果是的話，你可以選擇擴增高GC含量的酶和相應(yīng)的buffer 。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
7樓2017-03-15 22:04:04
kangaroo0513
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9樓2017-03-16 09:42:00
李保磊
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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為什么退火溫度一定是55℃，這個需要計算啊，有一定幅度，你可以多試幾次，溫度梯度；此外，擴不出來，也不一定是退火溫度，也可能是鎂離子濃度，模板，酶等的問題 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2017-03-16 12:29:59
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