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安格洛新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
微生物SEM 已有2人參與
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| 有沒(méi)有人做過(guò)SEM.不知能否給點(diǎn)意見(jiàn)，是這樣的，我一直在做SEM，但是每次結(jié)果都不怎么好，每次都會(huì)出現(xiàn)菌體結(jié)團(tuán)或被淹沒(méi)，我的方法基本上現(xiàn)將菌體離心，在用超純水清洗培養(yǎng)基等，在加入2.5%的戊二醛磷酸緩沖液進(jìn)行固定2-4個(gè)小時(shí)，在用超純水清洗里面的鹽類物質(zhì)幾次，在用乙醇梯度脫水，最后用叔丁醇置換脫水，再干燥。但是每次拍出的樣品菌體基本上是埋沒(méi)在其中，并不分散，不知道大家能否愿意分享相關(guān)經(jīng)驗(yàn) |
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2017-04-15 17:25:18, 1.27 M
2017-04-15 17:26:15, 1.27 M
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陳年韶光
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7樓2019-12-06 21:55:30
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2樓2017-05-05 10:24:46
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【答案】應(yīng)助回帖
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小冀-: 應(yīng)助指數(shù)+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-05-07 09:29:26
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安格洛: 金幣+5, 方法和我差不多，至少說(shuō)明我沒(méi)有偏離很遠(yuǎn)，可能是細(xì)節(jié)出了差錯(cuò) 2017-07-24 11:06:33
安格洛: 金幣+9, ★有幫助, 之前不知道怎么賞金幣，抱歉了，真的很謝謝你的熱心回復(fù)，科研路上不容易 2017-07-24 11:15:42
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| 收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的新鮮菌液，無(wú)菌水洗滌3次，置于2.5%戊二醛磷酸緩沖液（pH7.2）中，于4℃固定過(guò)夜；次日以0.15%的同一緩沖液沖洗；然后依次用40%、70%、90%和100%的乙醇分別脫水15 min；脫水后用醋酸戊脂置換乙醇；將上述樣品于真空冷凍干燥機(jī)中干燥 |
3樓2017-05-05 16:03:17
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4樓2017-05-05 16:04:40
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