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⑦了新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于RNAi檢測(cè)的問(wèn)題
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我構(gòu)建了RNAi載體，轉(zhuǎn)化了植株，提RNA反轉(zhuǎn) 檢基因表達(dá)，發(fā)現(xiàn)沒(méi)有被敲除，有可能是那些原因? 求大神指導(dǎo) 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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3樓2017-04-20 22:56:33
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2樓2017-04-20 22:55:07
⑦了
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4樓2017-04-21 09:05:10
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- 專業(yè): 植物生理與生化
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首先使用pcr檢測(cè)DNA確定載體被成功整合到植物基因組中；然后檢測(cè)RNAi載體在植物中有沒(méi)有表達(dá)，轉(zhuǎn)基因植物是不是用抗生素篩選過(guò)，用rt-pcr檢測(cè)抗性基因是否表達(dá)；如若載體已整合到基因組中并有表達(dá)，可能表達(dá)水平不高，形成的siRNA的量不足以沉默基因，可以選用轉(zhuǎn)基因的其他株系。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-04-21 16:35:49
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