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[求助]
關(guān)于RNAi檢測的問題
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我構(gòu)建了RNAi載體，轉(zhuǎn)化了植株，提RNA反轉(zhuǎn) 檢基因表達，發(fā)現(xiàn)沒有被敲除，有可能是那些原因? 求大神指導 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2017-04-20 22:55:07
3樓2017-04-20 22:56:33
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首先使用pcr檢測DNA確定載體被成功整合到植物基因組中；然后檢測RNAi載體在植物中有沒有表達，轉(zhuǎn)基因植物是不是用抗生素篩選過，用rt-pcr檢測抗性基因是否表達；如若載體已整合到基因組中并有表達，可能表達水平不高，形成的siRNA的量不足以沉默基因，可以選用轉(zhuǎn)基因的其他株系。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-04-21 16:35:49
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