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zhangmeiqiji銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
人源蛋白質(zhì)在細菌內(nèi)不能表達,求解
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| 我的蛋白是人源蛋白,克隆在pET-28a載體上,在BL21里表達的很好,但是后來需要換到pBAD載體上,得用DH10B表達,結(jié)果就表達不出來了,我確定克隆是沒問題的,序列都對,現(xiàn)在就懷疑是因為DH10B的蛋白酶基因沒有被敲掉,所以我的蛋白被降解掉了,想問問有沒有相關(guān)經(jīng)驗的高手,這樣可以怎么解決呢?可不可以在誘導(dǎo)表達的時候加蛋白酶抑制劑。炕蛘咭觽信號肽給拉到胞間質(zhì)表達嗎?我的蛋白還是需要一定表達量的,擔(dān)心胞間質(zhì)表達量會很低?求高手解答,不勝感激~謝謝 |
金蟲 (正式寫手)
銀蟲 (初入文壇)
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