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zhangmeiqiji銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
人源蛋白質(zhì)在細(xì)菌內(nèi)不能表達(dá)，求解
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| 我的蛋白是人源蛋白，克隆在pET-28a載體上，在BL21里表達(dá)的很好，但是后來需要換到pBAD載體上，得用DH10B表達(dá)，結(jié)果就表達(dá)不出來了，我確定克隆是沒問題的，序列都對，現(xiàn)在就懷疑是因?yàn)镈H10B的蛋白酶基因沒有被敲掉，所以我的蛋白被降解掉了，想問問有沒有相關(guān)經(jīng)驗(yàn)的高手，這樣可以怎么解決呢？可不可以在誘導(dǎo)表達(dá)的時(shí)候加蛋白酶抑制劑��？或者要加個(gè)信號肽給拉到胞間質(zhì)表達(dá)嗎？我的蛋白還是需要一定表達(dá)量的，擔(dān)心胞間質(zhì)表達(dá)量會很低啊？求高手解答，不勝感激~謝謝 |
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2樓2017-04-27 06:21:35
zhangmeiqiji
銀蟲 (初入文壇)
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3樓2017-05-01 18:21:48
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