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請(qǐng)問G418為什么要做預(yù)實(shí)驗(yàn)最佳殺傷濃度確定? 已有2人參與
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沒做過這個(gè)實(shí)驗(yàn),知道要做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳殺傷濃度,但是不知道為什么? 是這樣嗎 確定了最佳殺傷濃度之后,在目的基因轉(zhuǎn)染到細(xì)胞后,判斷是否轉(zhuǎn)染到細(xì)胞的染色體基因上了,第一次用這個(gè)濃度的抗生素加到細(xì)胞中(不做預(yù)實(shí)驗(yàn),不知道濃度從哪入手),因?yàn)檗D(zhuǎn)進(jìn)去的質(zhì)粒已經(jīng)含有了抗性,所以細(xì)胞不會(huì)死亡,會(huì)繼續(xù)生長,以此來篩選陽性克隆,是這個(gè)意思不?如果細(xì)胞死了,就是不能一上來加的濃度就把細(xì)胞直接都?xì)⑺,所以要做預(yù)實(shí)驗(yàn)。。。? |
| G418是用來篩選外源基因是否成功轉(zhuǎn)染細(xì)胞的一種方法,先拿普通細(xì)胞用不同濃度的G418來做梯度篩選,確認(rèn)能使細(xì)胞致死的最小濃度后再來篩選你的轉(zhuǎn)染細(xì)胞,如果細(xì)胞不死 代表轉(zhuǎn)染外源基因成功,你理解的對(duì) |
至尊木蟲 (著名寫手)
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