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請(qǐng)問G418為什么要做預(yù)實(shí)驗(yàn)最佳殺傷濃度確定？ 已有2人參與
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沒做過這個(gè)實(shí)驗(yàn)，知道要做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳殺傷濃度，但是不知道為什么? 是這樣嗎 確定了最佳殺傷濃度之后，在目的基因轉(zhuǎn)染到細(xì)胞后，判斷是否轉(zhuǎn)染到細(xì)胞的染色體基因上了，第一次用這個(gè)濃度的抗生素加到細(xì)胞中（不做預(yù)實(shí)驗(yàn)，不知道濃度從哪入手），因?yàn)檗D(zhuǎn)進(jìn)去的質(zhì)粒已經(jīng)含有了抗性，所以細(xì)胞不會(huì)死亡，會(huì)繼續(xù)生長(zhǎng)，以此來篩選陽性克隆，是這個(gè)意思不？如果細(xì)胞死了，就是不能一上來加的濃度就把細(xì)胞直接都?xì)⑺�，所以要做預(yù)實(shí)驗(yàn)。。。？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
MarchZR: 金幣+30, ★★★很有幫助, thanks~ 2017-05-18 13:36:42
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| G418是用來篩選外源基因是否成功轉(zhuǎn)染細(xì)胞的一種方法，先拿普通細(xì)胞用不同濃度的G418來做梯度篩選，確認(rèn)能使細(xì)胞致死的最小濃度后再來篩選你的轉(zhuǎn)染細(xì)胞，如果細(xì)胞不死 代表轉(zhuǎn)染外源基因成功，你理解的對(duì) |
2樓2017-05-09 11:00:41
3樓2017-05-09 11:01:27
yyy0305
至尊木蟲 (著名寫手)
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- 專業(yè): 生物技術(shù)藥物
4樓2017-05-10 11:49:26
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