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Zhibao1994新蟲 (小有名氣)
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[求助]
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實驗 已有2人參與
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向各位請教下關(guān)于DNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實驗。我最近在做質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實驗，將老師合成的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中。第一步是將細(xì)胞從零下八十?dāng)z氏度中取出放入冰盒中半個小時，同時預(yù)冷兩個1.5ml的離心管，待細(xì)胞融化后，將細(xì)胞分裝于兩個離心管（離心管已標(biāo)注轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒名稱），各100ul,第二步：加入2ul的質(zhì)粒，在冰上30分鐘。熱擊（42度，45秒)，然后冰上放2分鐘。第三步：加入SOC 0.9ml，然后在37度中培養(yǎng)一個小時，離心10分鐘，4000轉(zhuǎn)每分鐘。涂板（Kan，LB），37度培養(yǎng)隔夜觀察。老是只能看到幾個菌落。 @biostar2009 @youlinglyw 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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3樓2017-05-09 23:02:20
2樓2017-05-09 15:10:52
Zhibao1994
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4樓2017-05-10 06:27:37
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-05-10 07:55:08
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-05-10 07:55:08
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轉(zhuǎn)化弄桿菌:冰置30分鐘，37度1分鐘液氮2分鐘重復(fù)一次，冰置5分鐘，加不含抗生素LB，30度搖3個小時，涂板，30度倒置培養(yǎng)過夜。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-05-10 07:53:08
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