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CindyMo新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
RNAi轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn) 已有2人參與
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大家好,我最近在做畢設(shè)實(shí)驗(yàn),有些疑問(wèn)想咨詢下大家。 細(xì)胞是鼻咽癌細(xì)胞CNE-2 基因是krupple家族的某個(gè)基因 1.我是做RNAI的,目前打算做瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn), 瞬轉(zhuǎn)的方案是,打算合成siRNA,通過(guò)lipo2000導(dǎo)入細(xì)胞。 我想解決的是以下的問(wèn)題,求助各位大神指點(diǎn)迷津。 瞬轉(zhuǎn): 1.測(cè)轉(zhuǎn)染效率的話,大概什么實(shí)驗(yàn)方法比較好一點(diǎn)? 2.如果用帶熒光標(biāo)記的去轉(zhuǎn)染,對(duì)轉(zhuǎn)染效率影響大不大? 3.在哪些方面需要特別注意的。 穩(wěn)轉(zhuǎn): 我目前查到的有3個(gè)質(zhì)粒選擇pcDNA3.1和PGenesil1還有pGPU6/RFP/Neo 然后用G418篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞。 有大神用這三個(gè)做過(guò)實(shí)驗(yàn)嗎,能否提供一下自己在實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題,或者給些建議。謝謝啦~~ 我聽(tīng)有個(gè)老師說(shuō)pGPU6/RFP/Neo在篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的時(shí)候比較困難。 還有我還需要知道關(guān)于質(zhì)粒的哪些資料,去查詢,然后優(yōu)化我的實(shí)驗(yàn)方案, 因?yàn)橹挥幸荒甑臅r(shí)間,還要準(zhǔn)備考研,想提高一下效率,所以實(shí)驗(yàn)方面特別謹(jǐn)慎。 求各路大神支招!。。。。。! |
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銀蟲(chóng) (初入文壇)
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Problematic cell line: Probably contaminated. On the basis of the STR profile (PubMed=18196576) it is identical to CNE-1 and seems to be a hybrid of Hela and of cell line of unknow origin. Was originally thought to originate from a nasopharyngeal carcinoma from a male patient. 只是想該訴你一下這個(gè)細(xì)胞污染了 |
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