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CindyMo新蟲 (初入文壇)
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[交流]
RNAi轉(zhuǎn)染實驗 已有2人參與
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大家好，我最近在做畢設(shè)實驗，有些疑問想咨詢下大家。 細(xì)胞是鼻咽癌細(xì)胞CNE-2 基因是krupple家族的某個基因 1.我是做RNAI的，目前打算做瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)， 瞬轉(zhuǎn)的方案是，打算合成siRNA，通過lipo2000導(dǎo)入細(xì)胞。 我想解決的是以下的問題，求助各位大神指點迷津。 瞬轉(zhuǎn)： 1.測轉(zhuǎn)染效率的話，大概什么實驗方法比較好一點？ 2.如果用帶熒光標(biāo)記的去轉(zhuǎn)染，對轉(zhuǎn)染效率影響大不大？ 3.在哪些方面需要特別注意的。 穩(wěn)轉(zhuǎn)： 我目前查到的有3個質(zhì)粒選擇pcDNA3.1和PGenesil1還有pGPU6/RFP/Neo 然后用G418篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞。 有大神用這三個做過實驗嗎，能否提供一下自己在實驗中遇到的問題，或者給些建議。謝謝啦~~ 我聽有個老師說pGPU6/RFP/Neo在篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的時候比較困難。 還有我還需要知道關(guān)于質(zhì)粒的哪些資料，去查詢，然后優(yōu)化我的實驗方案， 因為只有一年的時間，還要準(zhǔn)備考研，想提高一下效率，所以實驗方面特別謹(jǐn)慎。 求各路大神支招！�。。。。。。� |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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2樓2017-06-05 08:58:29
cindy1217
銀蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 126.4
- 帖子: 17
- 在線: 20.1小時
- 蟲號: 1724316
- 注冊: 2012-03-29
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
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Problematic cell line: Probably contaminated. On the basis of the STR profile (PubMed=18196576) it is identical to CNE-1 and seems to be a hybrid of Hela and of cell line of unknow origin. Was originally thought to originate from a nasopharyngeal carcinoma from a male patient. 只是想該訴你一下這個細(xì)胞污染了 |
3樓2017-07-28 14:31:17
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