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嚇成驢新蟲 (初入文壇)
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[求助]
加抗生素的平板，目的基因連接轉(zhuǎn)化，菌長成一片，求指導 已有3人參與
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目的片段連接的T1載體，轉(zhuǎn)化的dh5α，平板加的卡那抗生素，為什么培養(yǎng)基會長成一片？我凃板時，涂了好久，干了��？有沒有可能是目的片段插到了卡那抗性的那個基因位點?請問那個目的基因連接在載體上是隨機連接上的嗎，還是就是固定連接在lacz那個位置的？小白研究生，剛剛新建的實驗室，就只有我一個人，啥都不懂，好慌，求大神詳細指點 IMG_20170616_113803.jpg IMG_20170616_dha5單克隆失敗.jpg |
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2樓2017-06-18 17:12:34
5樓2017-06-18 17:29:33
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
嚇成驢: 金幣+5, 好的，我試試amp， 2017-06-21 19:39:29
嚇成驢: 金幣+5, 好的，我試試amp， 2017-06-21 19:39:29
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抗生素問題可能性大一些，可能抗生素失效，或者溫度太高，之前有遇到過培養(yǎng)基溫度低快凝固加抗生素也會有這種情況。此外，轉(zhuǎn)化后搖菌時間是否太長？此外你用的peasy t1？這個載體有兩種抗性，換amp試試。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
20樓2017-06-21 16:22:30
小松鼠45
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-06-19 11:56:41
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-06-19 11:56:41
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抗生素要配成一千倍母液，-20度保存。用的時候，等培養(yǎng)基晾到不燙手的時候加進去，搖勻后倒平板。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2017-06-19 00:14:20
11樓2017-06-19 11:37:48
六維空想
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13樓2017-06-19 15:27:43
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15樓2017-06-19 23:49:57
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16樓2017-06-21 10:17:57
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4樓2017-06-18 17:18:48
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6樓2017-06-18 23:52:17
7樓2017-06-19 00:10:20
Unavos_李洋
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9樓2017-06-19 07:48:34
10樓2017-06-19 08:42:47
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