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[交流]
PCR失敗 已有4人參與
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用Fast DNA SPIN for Soil試劑盒提取了土壤總DNA ,稀釋后進(jìn)行pcr擴(kuò)增,可是擴(kuò)增總是失敗,電泳后沒有條帶,不知大家有沒有遇到這種情況,可不可以給我提點(diǎn)建議,謝謝大家 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
銀蟲 (小有名氣)

至尊木蟲 (職業(yè)作家)
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你的總DNA提取之后,電泳結(jié)果如何,首先要保證DNA沒有問題,然后是PCR擴(kuò)增,你的基因在這個總DNA里,是否存在,可以嘗試做一個陽性對照實驗,然后就是考慮PCR程序等問題 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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這種情況我們在做小鼠的全基因組提取的時候遇到過,而且做了三次跑膠一直都是這個樣子,老師說是基因組降解了,后來采取的解決措施是把原來的操作方法換掉了,改了兩個點(diǎn),一個是用試劑盒前處理成單細(xì)胞的方法,一個是試劑盒中間有一個操作,操作時間要求幾個小時,我們給縮短了時間,然后就成功了。 如果是PCR時出現(xiàn)的問題,就幫不了你。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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之前我也出現(xiàn)過這種情況,據(jù)有些文獻(xiàn)說,這可能是因為有抑制pcr的物質(zhì)存在,你可以試一試把稀釋后的DNA放入4℃冰箱幾天再做PCR,我們之前就是這樣做的! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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