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[交流]
PCR失敗 已有4人參與
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用Fast DNA SPIN for Soil試劑盒提取了土壤總DNA ,稀釋后進行pcr擴增，可是擴增總是失敗，電泳后沒有條帶，不知大家有沒有遇到這種情況，可不可以給我提點建議，謝謝大家 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2017-06-19 17:33:24
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張凡云
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你的總DNA提取之后，電泳結(jié)果如何，首先要保證DNA沒有問題，然后是PCR擴增，你的基因在這個總DNA里，是否存在，可以嘗試做一個陽性對照實驗，然后就是考慮PCR程序等問題 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-06-19 23:00:09
jingjing朱
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這種情況我們在做小鼠的全基因組提取的時候遇到過，而且做了三次跑膠一直都是這個樣子，老師說是基因組降解了，后來采取的解決措施是把原來的操作方法換掉了，改了兩個點，一個是用試劑盒前處理成單細胞的方法，一個是試劑盒中間有一個操作，操作時間要求幾個小時，我們給縮短了時間，然后就成功了。 如果是PCR時出現(xiàn)的問題，就幫不了你。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2017-06-20 06:32:37
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之前我也出現(xiàn)過這種情況，據(jù)有些文獻說，這可能是因為有抑制pcr的物質(zhì)存在，你可以試一試把稀釋后的DNA放入4℃冰箱幾天再做PCR,我們之前就是這樣做的！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2017-06-23 16:44:49
7樓2017-06-23 21:00:27
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