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灰原哀控新蟲(chóng) (小有名氣)
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怎樣配制焦油紫染液? 已有2人參與
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| 關(guān)于焦油紫染色,我在網(wǎng)絡(luò)上查了很久,發(fā)現(xiàn)配方眾說(shuō)紛紜、并未有一個(gè)統(tǒng)一的說(shuō)法,有的人說(shuō)是配制0.2%的焦油紫比較好,有的人則說(shuō)0.1%就夠了,有的人的配方里加入了乙酸、乙酸鈉,有的人沒(méi)有,把我搞暈了,我想請(qǐng)教一下做過(guò)焦油紫染色的大神們,你們實(shí)驗(yàn)室的焦油紫染液具體是怎么配制的?染色效果好嗎?可以的話順便請(qǐng)教一下你們實(shí)驗(yàn)室石蠟切片的焦油紫染色具體步驟,謝謝! |
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之前有接觸了解,正好為你解答一下。 1、焦油紫染液配制: 焦油紫染色液500ml:Buffer A:冰醋酸4.6ml,加水至400ml;BufferB:無(wú)水乙酸鈉2.72g,加水至100ml。328ml Buffer A與72ml Buffer B混合后用冰乙酸調(diào)pH 至4.0。上述溶液加1g焦油紫,充分混勻,靜置1周待用。 2、焦油紫染色步驟 1. 大鼠系列層面腦片(離前囟距離為1.60到-4.80mm),每個(gè)隔360μm.取一張。 2. 腦片貼在明膠玻片上,37℃烤箱24小時(shí)。然后進(jìn)行染色。 3. 75%酒精 5min。 4. 85%酒精 5min。 5. 95%酒精I(xiàn) 5min。 6. 95%酒精I(xiàn)I 5min。 7. 100%酒I 5min。 8. 100%酒精I(xiàn)I 8min。 9. 95%酒精3min。 10. 85%酒精3min。 11. 75%酒精3min。 12. 50%酒精3min。 13. ddH2O過(guò)一下。 14. CV染色液(搖晃)5-10min,視著色深淺而定。 15. 75%酒精過(guò)一下。 16. 85%酒精過(guò)一下。 17. 95%酒精過(guò)一下。 18. 100%酒精I(xiàn)過(guò)一下。 19. 100%酒精I(xiàn)I過(guò)一下。 20. 1:1乙醇/二甲苯5min。 21. 二甲苯I 5min。 22. 二甲苯II 5min。 23. 封片。 也可以參照鏈接地址:http://blog.sciencenet.cn/blog-266677-312023.html 。 |

新蟲(chóng) (小有名氣)

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