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灰原哀控新蟲 (小有名氣)
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[求助]
怎樣配制焦油紫染液？ 已有2人參與
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| 關(guān)于焦油紫染色，我在網(wǎng)絡(luò)上查了很久，發(fā)現(xiàn)配方眾說紛紜、并未有一個(gè)統(tǒng)一的說法，有的人說是配制0.2%的焦油紫比較好，有的人則說0.1%就夠了，有的人的配方里加入了乙酸、乙酸鈉，有的人沒有，把我搞暈了，我想請(qǐng)教一下做過焦油紫染色的大神們，你們實(shí)驗(yàn)室的焦油紫染液具體是怎么配制的？染色效果好嗎？可以的話順便請(qǐng)教一下你們實(shí)驗(yàn)室石蠟切片的焦油紫染色具體步驟，謝謝！ |
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4樓2017-07-06 00:06:13
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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之前有接觸了解，正好為你解答一下。 1、焦油紫染液配制： 焦油紫染色液500ml：Buffer A：冰醋酸4.6ml,加水至400ml；BufferB：無水乙酸鈉2.72g，加水至100ml。328ml Buffer A與72ml Buffer B混合后用冰乙酸調(diào)pH 至4.0。上述溶液加1g焦油紫，充分混勻，靜置1周待用。 2、焦油紫染色步驟 1. 大鼠系列層面腦片（離前囟距離為1.60到-4.80mm），每個(gè)隔360μm.取一張。 2. 腦片貼在明膠玻片上，37℃烤箱24小時(shí)。然后進(jìn)行染色。 3. 75%酒精 5min。 4. 85%酒精 5min。 5. 95%酒精I(xiàn) 5min。 6. 95%酒精I(xiàn)I 5min。 7. 100%酒I 5min。 8. 100%酒精I(xiàn)I 8min。 9. 95%酒精3min。 10. 85%酒精3min。 11. 75%酒精3min。 12. 50%酒精3min。 13. ddH2O過一下。 14. CV染色液（搖晃）5-10min，視著色深淺而定。 15. 75%酒精過一下。 16. 85%酒精過一下。 17. 95%酒精過一下。 18. 100%酒精I(xiàn)過一下。 19. 100%酒精I(xiàn)I過一下。 20. 1:1乙醇/二甲苯5min。 21. 二甲苯I 5min。 22. 二甲苯II 5min。 23. 封片。 也可以參照鏈接地址：http://blog.sciencenet.cn/blog-266677-312023.html 。 |
2樓2017-07-05 20:04:48
灰原哀控
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 301.1
- 散金: 50
- 帖子: 98
- 在線: 19.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 4033800
- 注冊(cè): 2015-08-22
- 專業(yè): 病毒學(xué)
3樓2017-07-05 23:05:22
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
5樓2017-07-06 09:31:20
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