 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4678 | 回復(fù): 3 | ||
暮_紫_新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
Stbl3感受態(tài)細(xì)胞制備疑惑 已有2人參與
|
|
1. 活化Stbl3（invitrogen）時，用LB平板的話需要加鏈霉素嗎，濃度為多少？因為產(chǎn)品說明書表明其帶鏈霉素抗性； 2. 用什么方法制備要好一些？CaCl2？ 3.平常用的熱激法就可以用于Stbl3的轉(zhuǎn)化了嗎？如果載體帶氨芐抗性，是否平板上要同時帶有氨芐和鏈霉素抗性？ 謝謝大家~~ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有127人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
zhouxfd
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 158 (高中生)
- 金幣: 4721.3
- 散金: 73
- 紅花: 22
- 帖子: 697
- 在線: 72.8小時
- 蟲號: 1427827
- 注冊: 2011-10-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
2樓2017-07-12 01:56:13
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
暮_紫_: 金幣+30, ★★★★★最佳答案 2017-07-14 12:13:23
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
暮_紫_: 金幣+30, ★★★★★最佳答案 2017-07-14 12:13:23
|
參照1990年《Gene》上刊登的由Inoue H.等提出的高效感受態(tài)的制備與轉(zhuǎn)化方法。 1、 活化Stbl3（invitrogen）時，什么抗生素都不加。 2、轉(zhuǎn)化時，感受態(tài)細(xì)胞膜由于吸附陽離子（Ca2+等）呈液晶狀態(tài)，受到熱激后，細(xì)胞膜出現(xiàn)裂隙，外源DNA進(jìn)入細(xì)胞，此時細(xì)胞非常脆弱，將其冰浴冷卻，細(xì)胞膜修復(fù)閉合，進(jìn)行下一步的復(fù)蘇時細(xì)胞存活率將提高。 CaCl2轉(zhuǎn)，電轉(zhuǎn)均可。電轉(zhuǎn)比較方便，但是CaCl2轉(zhuǎn)普遍效果較好。 3、熱激法是最好的方法。將該體系轉(zhuǎn)移到42℃下做短暫的熱刺激（90s），細(xì)胞膜的液晶結(jié)構(gòu)會發(fā)生劇烈擾動，并隨機(jī)出現(xiàn)許多間隙，外源DNA就可能被細(xì)胞吸收。進(jìn)入細(xì)胞的外源DNA分子通過復(fù)制、表達(dá)，實現(xiàn)遺傳信息的轉(zhuǎn)移，使受體細(xì)胞出現(xiàn)新的遺傳性狀。 最好是同時加 氨芐 和 鏈霉素抗性，降低假陽性。 |
3樓2017-07-12 10:39:03
大別克
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 14.8
- 帖子: 18
- 在線: 4.7小時
- 蟲號: 6497647
- 注冊: 2017-05-10
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
4樓2017-08-11 10:27:16
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 暮_紫_ 的主題更新
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿北京理工大學(xué)本科211材料工程294求調(diào)劑 +6 | mikasa的圍巾 2026-03-28 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 300求調(diào)劑，材料科學(xué)英一數(shù)二 +8 | leaflight 2026-03-24 | 8/400 |
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +6 | 楒桉 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 爭取九點睡 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩，一志愿湖南大學(xué)，初試成績338 +6 | YYYYYNNNNN 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 295材料工程專碩求調(diào)劑 +7 | 1428151015 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +8 | 邱gl 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 352分 化工與材料 +5 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 一志愿 西北大學(xué) 總分282 英語一62 求調(diào)劑
+7
|
18419759900 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 07化學(xué)280分求調(diào)劑 +10 | 722865 2026-03-23 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +7 | prayer13 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 085602 289分求調(diào)劑
+8
|
WWW西西弗斯 2026-03-24 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 263求調(diào)劑 +6 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境專碩324分求調(diào)劑推薦 +5 | 軒小寧—— 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)339材料與化工求調(diào)劑 +3 | 江往賣魚 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械學(xué)碩總分317求調(diào)劑�。。�！ +4 | Acaciad 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 086003食品工程求調(diào)劑 +6 | 淼淼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | plum李子 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿北化315 求調(diào)劑 +3 | akrrain 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 344求調(diào)劑 +3 | desto 2026-03-24 | 3/150 |
|