 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 干擾/敲除 » 嗜酸乳桿菌基因敲除的問題
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1349 | 回復: 6 | |||
[求助]
嗜酸乳桿菌基因敲除的問題
|
|
我現在將構建好的攜帶氯霉素抗性基因的敲除載體PNZ5319-luxS電轉化導入噬酸菌后，在含氯霉素抗性的MRS平板中有菌落長出，就進行了提全基因組后PCR驗證，p上游同源臂和下游同源臂。 我的問題是??1.現在狀態(tài)的菌長的很慢，長3，4天也不會很濃，所以提出的全基因組條帶也不是很亮? ?2.進行PCR，P出了在上下游位置的條帶，但是都不亮，所以無法送去測序，而且pcr結果都很不穩(wěn)定，很多時候P不出來。但是因為之前有P到，感覺這個基因是已經敲掉的，所以我不想放棄，因為之前電轉化也做了好幾個月，才有菌長出來的。我做這個實驗還是小白，所以請各位幫幫忙分析一下，不勝感激！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經有143人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經有0人回復
-
納米粒度分析
已經有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經有0人回復
-
留學--博士招生
已經有16人回復
-
化學工程，本211，求調劑，ab區(qū)不限
已經有4人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調劑
已經有0人回復
zbd1990
木蟲 (正式寫手)
- 應助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 10398.3
- 紅花: 16
- 帖子: 835
- 在線: 63.2小時
- 蟲號: 1472055
- 注冊: 2011-11-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-08-25 11:55:20
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-08-25 11:55:20
|
菌長的不濃就多接幾瓶搖瓶，并考慮降低氯霉素濃度，看看菌會不會長的更好一些。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2017-08-25 08:36:02
3樓2017-08-25 10:24:25
zbd1990
木蟲 (正式寫手)
- 應助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 10398.3
- 紅花: 16
- 帖子: 835
- 在線: 63.2小時
- 蟲號: 1472055
- 注冊: 2011-11-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學
|
菌對氯霉素的耐受性普遍都不是很好，我以前做的大概添加濃度只有1-2.5微克每毫升，建議你做一個不加氯霉素的當對照，看看是不是氯霉素濃度過高引起的菌生長不好。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2017-08-25 17:25:05
zbd1990
木蟲 (正式寫手)
- 應助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 10398.3
- 紅花: 16
- 帖子: 835
- 在線: 63.2小時
- 蟲號: 1472055
- 注冊: 2011-11-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學
|
一般情況添加抗生素主要是為了防止質粒丟失，所以理論上對已經有抗性的菌株不加抗生素并不會影響基因組DNA的提取。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
皮皮彤5樓2017-08-25 17:27:24
6樓2017-08-25 23:34:38
zbd1990
木蟲 (正式寫手)
- 應助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 10398.3
- 紅花: 16
- 帖子: 835
- 在線: 63.2小時
- 蟲號: 1472055
- 注冊: 2011-11-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學
7樓2017-09-05 07:06:46
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 皮皮彤 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工272求調劑 +14 | 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 | 14/700 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 299求調劑 +10 | 15188958825 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
[考研] 求調劑一志愿武漢理工大學材料工程（085601） +7 | WW.' 2026-03-23 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 340求調劑 +6 | Amber00 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 348求調劑 +5 | 小懶蟲不懶了 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 299求調劑 +7 | 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程，267求調劑 +16 | minht 2026-03-26 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學324求調劑 +7 | hanamiko 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085405 考的11408求各位老師帶走 +3 | Qiu學ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調劑推薦 材料 304 +15 | 荷包蛋hyj 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 265求調劑 +8 | 小木蟲085600 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 266分求材料化工冶金礦業(yè)等專業(yè)的調劑 +4 | 哇呼哼呼哼 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 279 分 求調劑 +4 | 睡個好覺_16 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 化學308分求調劑 +8 | 你好明天你好 2026-03-23 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學081700，初試分數271 +6 | kotoko_ik 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大085600，310分求調劑 +5 | 李瀟可 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉大071010，316分求調劑 +3 | xgbiknn 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 342求調劑 +3 | 加油a李zs 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調劑 +17 | 碩星赴 2026-03-23 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 化工專碩求調劑 +3 | question挽風 2026-03-24 | 3/150 |
|