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我在你在木蟲 (初入文壇)
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做WB時(shí)actin總不出，有時(shí)候需要孵育兩遍，目的蛋白也是，怎么解決 已有5人參與
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做western時(shí)，內(nèi)參actin經(jīng)常性不出，改變抗體濃度也試過 ，依舊不出，目的蛋白出的也不好，不知道什么原因，經(jīng)常需要孵育兩遍，最近一次做孵育兩遍依舊無(wú)actin，崩潰中，還有做wb前要測(cè)蛋白濃度么 ，蛋白濃度范圍在多少才合適，我之前測(cè)在30ug/ml左右，應(yīng)該不低吧。求大神指教。 |
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2樓2017-09-10 10:38:20
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需要測(cè)蛋白濃度，30ug/ml的濃度太低了，上樣量每孔需要10ug以上，所以樣品濃度起碼得0.5mg/ml以上了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
3樓2017-09-10 11:36:24
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-09-11 08:04:01
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2017-09-11 08:04:01
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上樣量增加一倍 actin濃度上調(diào) 抗體是國(guó)外的么 把批號(hào)以及包裝信息寫郵件發(fā)過去 也有可能是國(guó)內(nèi)小作坊套牌假抗體 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2017-09-10 11:40:13
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5樓2017-09-10 12:12:57
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6樓2017-09-10 12:16:33
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 擔(dān)心抗體質(zhì)量的話可以上www.labome.com用抗原蛋白名稱或是貨號(hào)查下相應(yīng)抗體的sci報(bào)道情況，盡量選那些報(bào)道比較多的. |
8樓2017-09-11 08:35:36
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9樓2017-09-11 11:48:20
10樓2017-10-14 16:57:02
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