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[求助]
關(guān)于克隆
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用已經(jīng)確定含有目的片段的菌（經(jīng)過克隆然后測序正確后擴(kuò)大培養(yǎng)的菌）進(jìn)行克隆，提取質(zhì)粒后，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，為什么不能擴(kuò)增出目的片段出來呢？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2017-09-20 08:16:58
4樓2017-09-20 09:10:39
不吃M的魚
金蟲 (小有名氣)
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- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
7樓2017-09-20 09:51:04
不吃M的魚
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哦哦哦，那如果試劑沒問題的話，模板可不可能污染了？其實(shí)不是你們的質(zhì)粒了？可用用載體上通用引物測個序看看。質(zhì)粒一般很好擴(kuò)增的，我們模板用5ng，條帶都賊亮賊亮的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2017-09-20 09:59:38
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我們是加了1μ的模板，總體系是25μ，濃度應(yīng)該沒有問題，因?yàn)橛袀�師姐也是這樣擴(kuò)增的。就有結(jié)果，我們的不同就在于所用的菌的培養(yǎng)時(shí)間不同，我的是以前的，她的是新?lián)u的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2017-09-20 09:00:33
5樓2017-09-20 09:17:43
6樓2017-09-20 09:20:46
8樓2017-09-20 09:54:39
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嗯嗯，但是那個質(zhì)粒本來就是從已經(jīng)測了序之后，擴(kuò)大培養(yǎng)里面的菌里提取出來的，這樣污染的可能性應(yīng)該不是太大吧！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2017-09-20 10:25:41
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