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galaxy_6新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于克隆
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用已經(jīng)確定含有目的片段的菌(經(jīng)過克隆然后測(cè)序正確后擴(kuò)大培養(yǎng)的菌)進(jìn)行克隆,提取質(zhì)粒后,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,為什么不能擴(kuò)增出目的片段出來呢? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
金蟲 (小有名氣)
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哦哦哦,那如果試劑沒問題的話,模板可不可能污染了?其實(shí)不是你們的質(zhì)粒了?可用用載體上通用引物測(cè)個(gè)序看看。質(zhì)粒一般很好擴(kuò)增的,我們模板用5ng,條帶都賊亮賊亮的。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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我們是加了1μ的模板,總體系是25μ,濃度應(yīng)該沒有問題,因?yàn)橛袀(gè)師姐也是這樣擴(kuò)增的。就有結(jié)果,我們的不同就在于所用的菌的培養(yǎng)時(shí)間不同,我的是以前的,她的是新?lián)u的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
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嗯嗯,但是那個(gè)質(zhì)粒本來就是從已經(jīng)測(cè)了序之后,擴(kuò)大培養(yǎng)里面的菌里提取出來的,這樣污染的可能性應(yīng)該不是太大吧! 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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