 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3899 | 回復: 7 | ||||
[交流]
什么是抗體片段和抗體片段化
|
||||
抗體片段化，就是用工具（蛋白酶及化學物質(zhì)）將抗體分子切成特定大小的片段。Why？因為在實際運用時，抗體分子真的太大了！抗體分子的分子量一般為幾百道爾頓（例如IgM五聚體就更龐大了），分子直徑在10 nm~15 nm之間，而制備成抗體片段后，就呈現(xiàn)出各自的優(yōu)勢。 各類型抗體及抗體片段的分子量 抗體片段特性及功能 抗體片段化后，因去掉了某些功能結構域以及分子量的改變，具有與全長抗體不同的特性： 1、顯著降低Fc的非特異性結合； 2、沉淀和免疫印跡中可降低抗體與proteinA、proteinG的結合； 3、更好的組織滲透性，免疫組化實驗中染色效果更優(yōu)異； 4、避免全長抗體的空間位阻效應，在固相抗原檢測中靈敏度更高； 5、在抗原-抗體結合研究中可避免Fc相關作用因子的干擾； 6、X-射線晶體學或核磁共振研究免疫識別的結構基礎時系統(tǒng)更加簡化； 7、體內(nèi)實驗時相對全長抗體具有更低的免疫原性； 8、能偶聯(lián)或結合酶、毒素、藥物及放射性核素等。 抗體片段的這些優(yōu)勢可使其很好地應用于免疫化學技術、臨床診斷及治療等領域。  IgG、IgM各結構域功能及各片段的特性 IgG片段化工具 木瓜蛋白酶Papain 來源于女生最愛的水果—番木瓜，非特異性的巰基蛋白內(nèi)切酶，分子量23 kDa，它在還原劑的存在下能將IgG切割成三個片段：2個Fab片段和1個Fc片段，最適反應pH6.5。木瓜蛋白酶最初是被用于制備Fab片段，不過它也可以用來制備F(ab')2片段，但是需要將其先用半胱氨酸活化，然后徹底去掉半胱氨酸再和IgG共同孵育。但是得到的F(ab')2片段并不均一，而且如果有半胱氨酸存在很容易過度切割。 胃蛋白酶Pepsin 由胃粘膜主細胞（gastric chief cell）分泌，非特異性的巰基蛋白內(nèi)切酶，分子量35 kDa，它能將IgG切割成1個F(ab')2片段加Fc的多肽碎片（Fc’，可通過透析等方法除去），在中性及堿性環(huán)境下會不可逆失活，最適反應pH1.0。F(ab')2片段在溫和的還原劑（如2-Mercaptoethylamine•HCl，2-MEA）作用下可得到2個單價的含巰基的Fab‘片段，這些片段因為自帶巰基可以用來偶聯(lián)檢測標記物而不影響片段的結合活性，當然也可以用N-Ethylmaleimide (NEM)將巰基保護起來防止再次形成F(ab')2。 無花果蛋白酶 來源于無花果樹的膠乳和不成熟的果實乳汁，非特異性的巰基蛋白酶，分子量26 kDa，它能在4 mM半胱氨酸的環(huán)境下將IgG切割成1個F(ab')2片段加Fc的多肽碎片（Fc’），或者在25 mM半胱氨酸的環(huán)境下將IgG切割成2個Fab片段加Fc的多肽碎片（Fc’），最適反應pH6.4。無花果蛋白酶水解IgG得到的F(ab')2片段大小與胃蛋白酶水解IgG得到的非常接近，而其免疫活性和親和力則與全長IgG1抗體別無二致，在制備鼠類IgG1的片段時無花果蛋白酶是首選。  IgG的片段化 IgM片段化工具 不同種屬的IgM片段化產(chǎn)物是有差異的，如鼠和人IgM在單體的連接方式上的不同導致二硫鍵位置的不同使得產(chǎn)物有差異，另外不同物種IgM上寡聚糖修飾的差異也會影響酶的切割，所以不同種屬的IgM進行片段化需要不同的條件，沒有一套通用的方案。 胃蛋白酶Pepsin：可將IgM切割成F(ab')2、Fab和Fv片段。 胰蛋白酶Trypsin：絲氨酸蛋白酶，最適反應pH8.0。可將IgM切割成F(ab')2、Fab、IgG型和Fc5片段。 化學試劑：2-MEA可將IgM處理成"IgG"型片段或/和還原型IgG ("rIgG"  片段。對小鼠IgM控制還原條件可以產(chǎn)生反轉的"IgG"型片段。 IgM的片段化 |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 Monoclonal Antibody |
» 猜你喜歡
材料調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復
-
295材料工程專碩求調(diào)劑
已經(jīng)有18人回復
-
081200-11408-276學碩求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復
-
材料求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復
-
材料求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復
-
材料專碩322分
已經(jīng)有10人回復
-
311求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復
-
0856，269分求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復
-
一志愿 南京郵電大學 288分 材料考研 求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復
-
085602化學工程268分蹲調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復
» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- PacBio長讀長致力醫(yī)學研究
已經(jīng)有1人回復
- 有沒高手做過PAR-CLIP？或者了解的？
已經(jīng)有2人回復
- 聚焦生物仿制藥系列
已經(jīng)有6人回復
- 論文上兩幅圖是什么技術做出來的
已經(jīng)有10人回復
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
【調(diào)劑信息】山東科技大學材料助劑研究團隊招收調(diào)劑碩士研究生
+1/391
-
安徽師范大學有機化學專業(yè)調(diào)劑
+1/284
-
【招聘】溫州醫(yī)科大學/附屬醫(yī)院/甌江實驗室李校堃院士團隊誠聘博士后和科研人員
+2/188
-
南方科技大學納米-飛秒-超快動力學課題組---誠聘博士后/助理研究員
+1/179
-
各位老師：山東科技大學化學與生物工程學院2026年碩士研究生調(diào)劑公告
+1/87
-
中國科學院深圳先進院唐永炳研究員團隊誠聘電化學/電池方向博士后
+1/44
-
歡迎化學、生物與醫(yī)藥、藥學，生物、食品等相關專業(yè)的同學
+1/37
-
食品科學與工程、生物與醫(yī)藥、食品營養(yǎng)接受調(diào)劑
+1/36
-
武漢工程大學化環(huán)學院程老師課題組招收化學類學碩、化學工程與環(huán)境工程專碩調(diào)劑
+2/34
-
材料/化學/環(huán)境 5-10人專碩, A類線，武漢紡織大學材料學院，能源高分子方向
+1/17
-
省雙一流重點學科，國家一流專業(yè)，輕工技術與工程，生物質(zhì)能源與材料
+1/10
-
招收2026專業(yè)代碼08開頭學術型碩士研究生
+1/9
-
福建農(nóng)林大學生物質(zhì)能源與材料研究中心調(diào)劑（08工科，考數(shù)學的來）
+1/8
-
韓國慶熙大學 Yu Taekyung 教授招2026年博士研究生
+1/7
-
江蘇科技大學機械工程學院海洋裝備仿生課題組招生簡介
+1/4
-
湖南工業(yè)大學生醫(yī)學院接受有機化學、生物與醫(yī)藥等方向的碩士調(diào)劑生
+1/3
-
【博士招生】廣東工業(yè)大學國家優(yōu)青課題組招收2026年博士生（環(huán)境/化學/材料/微生物）
+1/3
-
上海應用技術大學化工院招收調(diào)劑
+1/2
-
杭州電子科技大學 磁電功能材料創(chuàng)新團隊 招收碩士調(diào)劑生
+1/1
-
杭州師范大學-浙江省濕地智慧監(jiān)測與生態(tài)修復重點實驗室團隊碩士調(diào)劑公告
+1/1
3樓2017-09-21 14:24:23
7樓2018-07-05 16:18:26
8樓2018-09-25 23:51:37
簡單回復
2017-09-21 13:34
回復
jinkairui123(金幣+1): 謝謝參與
好
2017-09-21 14:24
回復
jinkairui123(金幣+1): 謝謝參與
wdxmu5樓
2017-09-21 18:25
回復
jinkairui123(金幣+1): 謝謝參與
一 發(fā)自小木蟲IOS客戶端
wwbqzhj6樓
2017-09-22 09:07
回復
jinkairui123(金幣+1): 謝謝參與
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 jinkairui123 的主題更新
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 081200-11408-276學碩求調(diào)劑 +5 | 崔wj 2026-03-26 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料求調(diào)劑 +6 | 呢呢妮妮 2026-04-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +7 | 莫xiao 2026-04-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +4 | 汪！？！ 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑推薦 材料 304 +21 | 荷包蛋hyj 2026-03-26 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 085600 295分求調(diào)劑 +13 | W55j 2026-03-30 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 生物與醫(yī)藥考研調(diào)劑 +5 | 鐵憨憨123425 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 314求調(diào)劑 +4 | 溪云珂 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑一志愿合肥工業(yè)大學 +14 | 秋二十二 2026-03-30 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程 085701，267求調(diào)劑 +15 | minht 2026-03-29 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 考研生物與醫(yī)藥調(diào)劑 +7 | 鐵憨憨123425 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 生物學308分求調(diào)劑（一志愿華東師大） +3 | 相信必會光芒萬?/a> 2026-03-31 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 335求調(diào)劑 +3 | 321* 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +9 | 小蠟新筆 2026-03-29 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 08開頭看過來�。�！ +3 | wwwwffffff 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 生物學 377分 +6 | zzll03 2026-03-31 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +3 | Acesczlo 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 不挑專業(yè) 求收留 +4 | Yam. 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 304材料求調(diào)劑
+5
|
鐘llll 2026-03-26 | 5/250 |
|