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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » DNA重組 » 分子生物學新手求助
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[求助]
分子生物學新手求助 已有1人參與
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求助大神，最近一直連接克隆載體連接不出來，每次測序都是空載。明明pcr都能P出目的條帶，但是測序就是空載。P的基因測序有錯配，怎么避免呢，新手剛開始做有點亂，不知道要買哪家的酶好，之前買了Takara的primeStar用了之后跑電泳還沒有全式金的easytaq mix條帶亮，但是感覺mix保真效果不好，我現(xiàn)在很茫然，不知道接下來怎么做，求助各位大神 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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莫落
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2樓2017-10-23 21:30:04
卡卡羅特zxg
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3樓2017-10-24 09:28:10
didongwei
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【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數(shù) +1
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高保真酶對模板要求比較高，你可以先用LA_Taq先擴增五個循環(huán)，再以此為模板用高保真酶擴增……至于是空載體，如果用的酶切連接法，考慮是不是內(nèi)切或者連接那部分有問題…… 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
4樓2017-10-24 12:10:50
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