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青青青也新蟲 (初入文壇)
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[求助]
基因克隆問題求助 已有1人參與
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求助有基因克隆經(jīng)驗(yàn)的老師同學(xué)們： 我想克隆5個(gè)同屬植物物種的目標(biāo)同源基因，現(xiàn)有同屬另一物種的全基因組序列，且目標(biāo)同源基因在擬南芥中有全長序列，在煙草和番茄等作物里有cDNA全長序列。因?yàn)榭赡芤鲂蛄斜葘托蛄薪Y(jié)構(gòu)分析，我希望能得到該同源基因在目標(biāo)物種中的全長序列和cDNA全長序列。 這種情況下，一般會(huì)先擴(kuò)增cDNA序列還是基因全長序列？是先用同屬物種的全基因組序列與擬南芥中的目標(biāo)基因序列比對，得到基因全長，再設(shè)計(jì)引物擴(kuò)出每段外顯子序列，得到cDNA全長；還是先設(shè)計(jì)簡并引物克隆得到cDNA序列，去和同屬物種的基因組比對，摳出完整的基因序列，再用RACE方法得到全長呢？ 因?yàn)榛蚩寺〉慕?jīng)驗(yàn)不足，還望幫助解答！謝謝！ |
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小昔米
鐵蟲 (初入文壇)
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- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
2樓2021-04-27 09:10:15
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