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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 動植物 » 實驗技術 » 基因克隆問題求助
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[求助]
基因克隆問題求助 已有1人參與
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求助有基因克隆經驗的老師同學們： 我想克隆5個同屬植物物種的目標同源基因，現有同屬另一物種的全基因組序列，且目標同源基因在擬南芥中有全長序列，在煙草和番茄等作物里有cDNA全長序列。因為可能要做序列比對和序列結構分析，我希望能得到該同源基因在目標物種中的全長序列和cDNA全長序列。 這種情況下，一般會先擴增cDNA序列還是基因全長序列？是先用同屬物種的全基因組序列與擬南芥中的目標基因序列比對，得到基因全長，再設計引物擴出每段外顯子序列，得到cDNA全長；還是先設計簡并引物克隆得到cDNA序列，去和同屬物種的基因組比對，摳出完整的基因序列，再用RACE方法得到全長呢？ 因為基因克隆的經驗不足，還望幫助解答！謝謝！ |
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2樓2021-04-27 09:10:15
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