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會(huì)思考的大鵝新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
已知酶底物，怎么獲得這種酶的基因或蛋白序列？
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我想要研究一個(gè)雞的酶暫稱(chēng)為A，它在人和鼠和其他物種存在，并且能夠查到他們的基因和蛋白的序列，而通過(guò)酶底物活性測(cè)定確定了雞體內(nèi)有能夠催化和人的酶A相同底物的這種酶，之前研究也是通過(guò)不同物種這個(gè)酶基因的保守區(qū)設(shè)計(jì)引物P出一小段基因，但是比對(duì)結(jié)果與雞同家族的另一酶B同源性高達(dá)90以上，所以很困惑現(xiàn)在P到的這一小段如果就是酶B，那么酶B的底物我不確定是不是和酶A相同啊，也有文獻(xiàn)說(shuō)酶B底物是其他的， 那么我現(xiàn)在有必要用RACE繼續(xù)擴(kuò)增他的全長(zhǎng)看是不是就是酶B呢？ 或者 我可以用人的酶A的抗體調(diào)取雞的同源蛋白做免疫沉淀在測(cè)序，和酶B做對(duì)比嗎？(因?yàn)槟軌虼x該底物的酶在雞體內(nèi)沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道它的基因或蛋白序列，我不能買(mǎi)到抗雞酶A的抗體來(lái)研究它。) 還是說(shuō)想要研究酶A與其它轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控作用，可以不用抗體，不知道基因序列也可以研究，（因?yàn)槟壳熬椭恢来嬖诖x這個(gè)底物的酶和一段與別的酶同源很高的基因序列）所以我很困惑，希望有沒(méi)有大神來(lái)解答一下我的疑問(wèn)，或者有沒(méi)有好的思路，相似的研究分享一下。謝謝啦  @gyesang |
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2樓2018-06-04 12:56:05
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3樓2018-06-05 09:35:56
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