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會思考的大鵝新蟲 (初入文壇)
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[求助]
已知酶底物，怎么獲得這種酶的基因或蛋白序列？
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我想要研究一個雞的酶暫稱為A，它在人和鼠和其他物種存在，并且能夠查到他們的基因和蛋白的序列，而通過酶底物活性測定確定了雞體內有能夠催化和人的酶A相同底物的這種酶，之前研究也是通過不同物種這個酶基因的保守區(qū)設計引物P出一小段基因，但是比對結果與雞同家族的另一酶B同源性高達90以上，所以很困惑現(xiàn)在P到的這一小段如果就是酶B，那么酶B的底物我不確定是不是和酶A相同啊，也有文獻說酶B底物是其他的， 那么我現(xiàn)在有必要用RACE繼續(xù)擴增他的全長看是不是就是酶B呢？ 或者 我可以用人的酶A的抗體調取雞的同源蛋白做免疫沉淀在測序，和酶B做對比嗎？(因為能夠代謝該底物的酶在雞體內沒有文獻報道它的基因或蛋白序列，我不能買到抗雞酶A的抗體來研究它。) 還是說想要研究酶A與其它轉錄因子的調控作用，可以不用抗體，不知道基因序列也可以研究，（因為目前就只知道存在代謝這個底物的酶和一段與別的酶同源很高的基因序列）所以我很困惑，希望有沒有大神來解答一下我的疑問，或者有沒有好的思路，相似的研究分享一下。謝謝啦  @gyesang |
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會思考的大鵝
新蟲 (初入文壇)
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3樓2018-06-05 09:35:56
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2樓2018-06-04 12:56:05
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