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關(guān)Q想畢業(yè)新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
T4-DNA連接酶使用體系 已有1人參與
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請(qǐng)問(wèn)下使用過(guò)T4-DNA連接酶的朋友們，你們的反應(yīng)體系是怎樣的啊？還有載體長(zhǎng)度和目的片段長(zhǎng)度都是多長(zhǎng)呀？ 我自己的載體片段是5000多，目的片段2000，雙酶切驗(yàn)證的時(shí)候，載體片段很亮，但是目的片段只能看見(jiàn)非常非常淺的一條帶，反應(yīng)體系是4°過(guò)夜連接，兩個(gè)片段各2μl，T4-DNA連接酶1μl，buffer1μl，水4μl，有大神知道是什么原因嗎？感謝！ @biostar2009 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
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關(guān)Q想畢業(yè)(淵博震天代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-10-07 19:55:46
關(guān)Q想畢業(yè)(淵博震天代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-10-07 19:55:46
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你的反應(yīng)體系里目標(biāo)片段數(shù)量太少了。載體片段：目標(biāo)片段在1:4~1:10之間比較合適。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
2樓2018-10-06 19:42:25
3樓2018-10-06 22:51:04
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
關(guān)Q想畢業(yè)(淵博震天代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-10-07 19:55:36
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
關(guān)Q想畢業(yè)(淵博震天代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-10-07 19:55:36
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4樓2018-10-07 08:57:34
關(guān)Q想畢業(yè)
新蟲(chóng) (小有名氣)
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5樓2018-10-07 11:33:30
關(guān)Q想畢業(yè)
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6樓2018-10-07 11:33:58
關(guān)Q想畢業(yè)
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嗯嗯，我看那個(gè)說(shuō)明書(shū)上也是這么寫(xiě)得，但是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室的師姐之前都是這么做的所以也跟著這么做了，我去試試您說(shuō)的，感謝回復(fù) 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
7樓2018-10-07 11:36:29
★ ★
關(guān)Q想畢業(yè)(淵博震天代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-10-07 19:55:21
關(guān)Q想畢業(yè)(淵博震天代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2018-10-07 19:55:21
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通常是16或者22，前段:載體的摩爾比控制在3:1-10:1 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
8樓2018-10-07 14:42:43
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多說(shuō)一句，聽(tīng)實(shí)驗(yàn)室其他人講，不如安心把說(shuō)明書(shū)找來(lái)仔細(xì)閱讀。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
9樓2018-10-07 14:43:43
關(guān)Q想畢業(yè)
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嗯嗯，感謝您的指導(dǎo)，我已經(jīng)準(zhǔn)備重新按照說(shuō)明書(shū)調(diào)整體系了，非常感謝 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
10樓2018-10-07 19:37:37
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