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關(guān)Q想畢業(yè)新蟲 (小有名氣)
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[求助]
T4-DNA連接酶使用體系 已有1人參與
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請問下使用過T4-DNA連接酶的朋友們,你們的反應(yīng)體系是怎樣的?還有載體長度和目的片段長度都是多長呀? 我自己的載體片段是5000多,目的片段2000,雙酶切驗證的時候,載體片段很亮,但是目的片段只能看見非常非常淺的一條帶,反應(yīng)體系是4°過夜連接,兩個片段各2μl,T4-DNA連接酶1μl,buffer1μl,水4μl,有大神知道是什么原因嗎?感謝! @biostar2009 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |

金蟲 (正式寫手)
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你的反應(yīng)體系里目標(biāo)片段數(shù)量太少了。載體片段:目標(biāo)片段在1:4~1:10之間比較合適。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |


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