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我愛江蘇新蟲 (初入文壇)
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[求助]
如何回復(fù)審稿人意見
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審稿人提出3個問題比較棘手,感覺很難回復(fù),想求教大神。 心中的設(shè)想是:1.盡可能少補實驗;2.能夠讓審稿人信服。 問題1審稿人問我在做實時定量PCR時是否做了測序?我在方法部分闡述,通過熔融曲線來驗證擴增產(chǎn)物的特異性?審稿人似乎對這樣的驗證方法不夠信服。(但是師姐之前發(fā)表的文章,在方法部分也是如此闡述,使用熔融曲線判斷其特異性)。我問了朋友,她說可以做凝膠電泳。這也是一種手段,但最直接的恐怕還是測序。但是我看很多PCR方法部分都沒有提及測序來驗證擴增的特異性。我該怎么說服審稿人呢? 2.實時PCR內(nèi)參基因個數(shù):審稿人提出僅僅選擇一個內(nèi)參基因很難讓人滿意,說不符合MIQE指南,我看了下這個指南,指南提出一般在預(yù)實驗中進行3-4個管家基因的篩選。選擇差異最小的那個基因。我們沒有進行過這樣的篩選,就直接用文獻中人家使用的內(nèi)參基因是什么,我就用了什么內(nèi)參基因。所以我想如果直接引用文獻,是否有說服力?(文獻中的細胞和我不同,但是處理條件相同)。 3.最難回答的部分: 我做了免疫組化,發(fā)現(xiàn)我要測得蛋白在該種細胞中的表達很低,(文獻也報道如此),在第一次回復(fù)審稿人意見時,審稿人就提出你是否做了免疫組化來體現(xiàn)這種蛋白具體在哪種細胞中表達?我有給出回答,我把自己的結(jié)果和文獻中的結(jié)果都展示了,(其實導(dǎo)師當初看到我的免疫組化結(jié)果,靶細胞中表達很低,就讓我不要把這個結(jié)果放到文章中,容易被審稿人挑刺。我就補了組織wb,但最后越隱藏審稿人越問)。這樣一來,審稿人就會覺得矛盾:這個靶蛋白在這種細胞中表達很低,你為什么還選用這個細胞?我該怎么回答比較好呢? 4.wb條帶;審稿人提出我的條帶與內(nèi)參基因不是在一塊膠上跑出來的,因條帶的笑臉的方向都不一致。說這樣如何保證膠與膠之間的差異?現(xiàn)實是,有時候內(nèi)參和目標基因分子量很近,沒法跑在一塊膠上。有時候有趨勢的條帶,內(nèi)參又跑的不是很齊,只能重新跑一個漂亮的內(nèi)參。那么我該如何回復(fù)審稿人,讓其信服呢? 在這里先感謝大神的幫助了!! |
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