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我愛江蘇新蟲 (初入文壇)
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[求助]
如何回復(fù)審稿人意見
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審稿人提出3個(gè)問題比較棘手，感覺很難回復(fù)，想求教大神。 心中的設(shè)想是：1.盡可能少補(bǔ)實(shí)驗(yàn)；2.能夠讓審稿人信服。 問題1審稿人問我在做實(shí)時(shí)定量PCR時(shí)是否做了測(cè)序？我在方法部分闡述，通過熔融曲線來驗(yàn)證擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性？審稿人似乎對(duì)這樣的驗(yàn)證方法不夠信服。（但是師姐之前發(fā)表的文章，在方法部分也是如此闡述，使用熔融曲線判斷其特異性）。我問了朋友，她說可以做凝膠電泳。這也是一種手段，但最直接的恐怕還是測(cè)序。但是我看很多PCR方法部分都沒有提及測(cè)序來驗(yàn)證擴(kuò)增的特異性。我該怎么說服審稿人呢？ 2.實(shí)時(shí)PCR內(nèi)參基因個(gè)數(shù)：審稿人提出僅僅選擇一個(gè)內(nèi)參基因很難讓人滿意，說不符合MIQE指南，我看了下這個(gè)指南，指南提出一般在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行3-4個(gè)管家基因的篩選。選擇差異最小的那個(gè)基因。我們沒有進(jìn)行過這樣的篩選，就直接用文獻(xiàn)中人家使用的內(nèi)參基因是什么，我就用了什么內(nèi)參基因。所以我想如果直接引用文獻(xiàn)，是否有說服力？（文獻(xiàn)中的細(xì)胞和我不同，但是處理?xiàng)l件相同）。 3.最難回答的部分： 我做了免疫組化，發(fā)現(xiàn)我要測(cè)得蛋白在該種細(xì)胞中的表達(dá)很低，（文獻(xiàn)也報(bào)道如此），在第一次回復(fù)審稿人意見時(shí)，審稿人就提出你是否做了免疫組化來體現(xiàn)這種蛋白具體在哪種細(xì)胞中表達(dá)？我有給出回答，我把自己的結(jié)果和文獻(xiàn)中的結(jié)果都展示了，（其實(shí)導(dǎo)師當(dāng)初看到我的免疫組化結(jié)果，靶細(xì)胞中表達(dá)很低，就讓我不要把這個(gè)結(jié)果放到文章中，容易被審稿人挑刺。我就補(bǔ)了組織wb，但最后越隱藏審稿人越問）。這樣一來，審稿人就會(huì)覺得矛盾：這個(gè)靶蛋白在這種細(xì)胞中表達(dá)很低，你為什么還選用這個(gè)細(xì)胞？我該怎么回答比較好呢？ 4.wb條帶；審稿人提出我的條帶與內(nèi)參基因不是在一塊膠上跑出來的，因條帶的笑臉的方向都不一致。說這樣如何保證膠與膠之間的差異？現(xiàn)實(shí)是，有時(shí)候內(nèi)參和目標(biāo)基因分子量很近，沒法跑在一塊膠上。有時(shí)候有趨勢(shì)的條帶，內(nèi)參又跑的不是很齊，只能重新跑一個(gè)漂亮的內(nèi)參。那么我該如何回復(fù)審稿人，讓其信服呢？ 在這里先感謝大神的幫助了�。�！ |
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6樓2019-04-09 22:03:13
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