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13522429893新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關于16596bp長片段擴增 已有2人參與
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我要擴增16956長片段,一共做了4次,樣品分別有7,11,10,8個。第一次用的7個樣品單程一次擴增成功而且條帶挺好的,二代建庫然后測序數(shù)據(jù)也不錯;第二次11個也都1次成功,純化后建庫送測了。但是第三次和第四次成功率明顯下降,第三次成功了4次,第4次成功了2個。PCR儀,孔位,都是一樣的,用的酶和buffer等也都是-20保存用之前混勻。DNA樣本都用康為世紀試劑盒提取的,經(jīng)過檢查濃度和純度都合格。還有哪個方面會導致這樣的情況呢? 擴增程序:98℃ 2min.(98℃ 10s.68℃ 10min). 68℃ 20min.4℃ forever 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
你好 最近我也遇到擴增長片段問題,請問你的長片段擴增成功了嗎?能分享一下做法嗎?![]() 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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