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13522429893新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于16596bp長(zhǎng)片段擴(kuò)增 已有2人參與
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我要擴(kuò)增16956長(zhǎng)片段，一共做了4次，樣品分別有7，11，10，8個(gè)。第一次用的7個(gè)樣品單程一次擴(kuò)增成功而且條帶挺好的，二代建庫(kù)然后測(cè)序數(shù)據(jù)也不錯(cuò);第二次11個(gè)也都1次成功，純化后建庫(kù)送測(cè)了。但是第三次和第四次成功率明顯下降，第三次成功了4次，第4次成功了2個(gè)。PCR儀，孔位，都是一樣的，用的酶和buffer等也都是-20保存用之前混勻。DNA樣本都用康為世紀(jì)試劑盒提取的，經(jīng)過(guò)檢查濃度和純度都合格。還有哪個(gè)方面會(huì)導(dǎo)致這樣的情況呢？ 擴(kuò)增程序:98℃ 2min.(98℃ 10s.68℃ 10min). 68℃ 20min.4℃ forever 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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4樓2019-10-15 14:09:44
樹(shù)影_色彩
新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 686.3
- 散金: 671
- 紅花: 3
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- 在線: 60.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 5130768
- 注冊(cè): 2016-10-17
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- 專業(yè): 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
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myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香，鼓勵(lì)積極發(fā)帖交流互幫互助。 2019-09-23 20:45:35
myprayer: 金幣+1, 贈(zèng)人玫瑰，手有余香，鼓勵(lì)積極發(fā)帖交流互幫互助。 2019-09-23 20:45:35
你好 最近我也遇到擴(kuò)增長(zhǎng)片段問(wèn)題，請(qǐng)問(wèn)你的長(zhǎng)片段擴(kuò)增成功了嗎？能分享一下做法嗎？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
2樓2019-09-23 17:00:13
kidyi
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 16
- 帖子: 9
- 在線: 6.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3918397
- 注冊(cè): 2015-06-10
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學(xué)
3樓2019-10-14 16:59:11
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