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medicilon

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[交流] 二甲雙胍體外抗宮頸癌細胞增殖作用研究及二甲雙胍的不良反應

根據細胞實驗研究、動物實驗和臨床研究發(fā)現，二甲雙胍具有治療宮頸癌的作用，但其作用機制有待進一步研究。細胞實驗服務一般可以提供細胞凋亡、細胞活力檢測、細胞增殖等服務，體外細胞實驗研究表明二甲雙胍對宮頸癌Hela細胞的增殖抑制作用。
細胞實驗服務可以為科研人員提供科學實驗技術咨詢和研發(fā)服務，共享實驗資源，解決實驗難題。細胞實驗服務常采用的方法有MTT比色法，它是常用的檢測細胞存活和生長的方法之一。
MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT 還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的甲瓚，用酶標儀在490nm波長處測定其光吸收值，在一定細胞數范圍內，甲瓚結晶形成的量與細胞數成正比，因此490nm波長處的吸光值可間接反映活細胞數量。該方法已廣泛用于抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。
上海美迪西的生物部在分子生物學、細胞生物學、體外生物學和結構生物學領域有豐富廣泛的經驗。從最初的cDNA文庫構建到藥物設計，通過蛋白質純化，結構測定和分析測定，提供一套完整的生物學服務。
對二甲雙胍的抗腫瘤作用研究表明，存在一個生物學機制通過AMPK(磷酸腺苷活化蛋白激酶)激活和一直胰島素信號，來介導二甲雙胍的抗癌作用。目前認為二甲雙胍主要通過抑制哺乳動物雷帕霉素靶蛋白、信號轉導子和轉錄激活子3蛋白合成、人類腫瘤髓細胞白血病蛋白表達和降低循環(huán)中胰島素/胰島素生長樣因子水平等多種途徑，抑制癌細胞生長、分化、增殖和侵襲轉移，實現對宮頸癌的治療作用。除此之外，二甲雙胍還可能具有使放化療增敏的作用。
1、MTT法檢測二甲雙胍對宮頸癌Hela細胞增殖作用研究
MTT法檢測常包含在一些公司提供的細胞實驗服務中。將宮頸癌Hela細胞分為空白對照組、不同濃度(0.01、0.5、1、5、10、20mmol/L)二甲雙胍組，采用MTT法檢測不同濃度二甲雙胍對宮頸癌Hela細胞的增殖活性的影響；并應用AO/EB染色和流式細胞儀研究二甲雙胍的體外抗腫瘤機制。
將1.0mmol/L及5.0mmol/L的二甲雙胍與25mg/L、50mg/L的卡鉑單一或聯合作用宮頸癌Hela細胞，采用MTT法檢測各組細胞OD值，計算細胞增殖抑制率。結果二甲雙胍對宮頸癌Hela細胞體外增殖能力有明顯的抑制作用，且呈明顯的濃度依賴性和時間依賴性；與對照組比較，熒光顯微鏡下計數發(fā)現不同濃度二甲雙胍作用宮頸癌Hela細胞24h后，隨著二甲雙胍濃度的增加，細胞凋亡率逐漸升高(P<0.05)，而以不同濃度(0、1、5mmol/L)二甲雙胍培養(yǎng)宮頸癌Hela細胞48h后，流式細胞儀檢測實驗組Hela細胞處于G0/G1期比例升高，S期細胞比例下降，差異具有統計學意義(P<0.05)。
二甲雙胍聯合卡鉑對抑制宮頸癌Hela細胞增殖具有協同作用，且隨著二甲雙胍濃度的增加，細胞增殖抑制率增加(P<0.05)。結論證實二甲雙胍對體外宮頸癌Hela細胞增殖有明顯的抑制作用，它是通過誘導細胞凋亡、細胞周期G0/G1期阻滯來實現的；二甲雙胍與卡鉑聯合應用能夠增強卡鉑對宮頸癌Hela細胞的增殖抑制作用。然而二甲雙胍不能亂用，它具有以下5種不良反應和危害，解決不好，后果真的很嚴重。
2、二甲雙胍的副作用
（1）帶來的胃腸道疾病
二甲雙胍最常見的不良癥狀是胃腸道的反應，癥狀有腹瀉、腹痛、厭食、惡心、嘔吐、胃脹、腹部不適、消化不良等。個別患者應用后口中有金屬味，極個別會出現消化性潰瘍，胃、十二指腸球部炎癥。
因此，不在空腹或飯前服用二甲雙胍，應該在進餐過程中服用。剛開始服用二甲雙胍的糖友，可以在第一周的晚餐時服用一次藥物。因為這些不良反應常常與劑量有關，所以應從小劑量（500毫克/天）開始使用，再逐漸增加劑量，以使胃腸道慢慢適應。每日用量最好不要超過2克�？梢钥紤]使用特殊劑型，如腸溶片、緩釋片，這些劑型比起普通劑型來說，引起的胃腸道不良反應更少。
（2）引起乳酸酸中毒
相對于苯乙雙胍，二甲雙胍引起乳酸酸中毒的風險極小，但當合并合并應用非甾體類抗炎藥與利尿劑可增加乳酸酸中毒的風險。因此二甲雙胍合并用其他藥物一定要在醫(yī)生的指導下進行，一旦出現中毒癥狀一定要及時就醫(yī)，并說明服藥情況。
（3）引起皮膚損害及過敏反應
二甲雙胍可引起皮膚瘙癢、皮疹、多形性紅斑、水泡等。也曾經有剝脫性皮炎、脫發(fā)等全身皮損的報道，但罕見。一般癥狀較輕時停藥后可自愈，若出現皮損應采取相應的處理措施，嚴重過敏反應導致過敏性休克者極為罕見。
（4）引起低血糖癥狀
單獨使用二甲雙胍通常不引起低血糖，但在應用二甲雙胍時如果有劇烈運動、大量飲酒或空腹飲酒、進食量不足時有可能發(fā)生；與其他抗糖尿病藥物或胰島素聯合使用時增加低血糖的風險。因此服用二甲雙胍時應戒酒；保證足夠的進食量；劇烈運動后不要立即服用二甲雙胍。
（5）血液系統的異常
個別患者長期應用二甲雙胍有可能減少維生素B12的吸收，有可能對血液系統產生不良影響，出現巨幼紅細胞性貧血，但罕見。出現這種情況比較罕見，所以，必要時可檢查血象。
其實，相對于很多藥物來說，二甲雙胍安全性是良好的，二甲雙胍在2型糖尿病的治療中發(fā)揮著至關重要的作用。其他研究也表明二甲雙胍在多種癌癥中都具有抗腫瘤作用，包括乳腺癌、前列腺癌、結腸癌和卵巢癌。臨床和實驗室研究也表明，二甲雙胍可以提高病人對化療的反應。目前的研究來看，二甲雙胍使用者對化療的反應最好。因此二甲雙胍逾半個世紀的應用是積累了大量的經驗，其作為一線用藥的地位至今未能撼動。

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1樓 2018-12-20 09:33:31

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