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miaochunwen銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【交流】羥乙基淀粉40 已有2人參與
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討教關(guān)于乙基淀粉40生產(chǎn)中熱原控制問題，我最近做了幾批羥乙基淀粉40，成品檢測中熱原項均不符合要求。不知問題出在哪？請那位高人指點。拜托了。 [ Last edited by jw227 on 2009-9-24 at 15:57 ] |
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agandaidai
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8樓2010-09-03 14:12:34
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采用家兔法。亦可用細菌內(nèi)毒素檢查法，有異議時用家兔法仲裁。 1 家兔法 按《生物制品熱原質(zhì)試驗規(guī)程》進行，判定標準按該規(guī)程4.2項要求進行，其抽樣方法與注射劑量如下： 1.1 抗凝劑 按家兔體重2ml/kg注射。 1.2 采血器及分血漿器 采血器及分血漿器應(yīng)有批號，每批抽一定數(shù)量進行檢查，方法為用100ml氯化鈉注射液通過，檢查流過液，應(yīng)無肉眼可見的混濁或異物，注射劑量按家兔體重10ml/kg注射，合格后方能使用。 1.3 分血漿袋 抽取分血漿袋10只，用100ml氯化鈉注射液清洗，檢查清洗液，應(yīng)無肉眼可見的混濁和異物，按家兔體重10ml/kg注射。 2 細菌內(nèi)毒素檢查法 2.1 試驗要求 2.1.1 用具處理 試驗所用器皿需除去可能存在的外源性內(nèi)毒素，常用的方法是250℃至少30分鐘或180℃至少2小時干烤。 2.1.2 鱟試劑靈敏度復(fù)核 根據(jù)鱟試劑靈敏度的標示值（λ）將細菌內(nèi)毒素國家標準品，用細菌內(nèi)毒素檢查用水溶解，在旋渦混合器上混合15分鐘，然后制備成合適的2倍稀釋濃度，即2λ、λ、0.5λ、0.25λ備用，每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混合30秒鐘，按2.2項試驗，每一稀釋液平行做4管，如最高濃度4管均為陽性，最低濃度4管均為陰性，按下式計算鱟試劑靈敏度測定值（λc）。 Λc=log-1（ΣΧ）/4 X為反應(yīng)終點內(nèi)毒素濃度的對數(shù)值。 當λc在0.5～2.0λ（包括0.5λ和2.0λ）時，方可用于細菌內(nèi)毒素檢查，并以λc為該批鱟試劑的靈敏度。每批新的鱟試劑在用于試驗前都要進行靈敏度的復(fù)核。 2.1.3 供試品干擾試驗 按2.1.2項試驗，用供試品的最大有效稀釋液將細菌內(nèi)毒素國家標準品制成2.0λ、0.5λ、0.25λ濃度稀釋液。供試品的最大有效稀釋倍數(shù)（D）按下式計算： D=L/λ L為供試品的細菌內(nèi)毒素限值（EU/ml）。 如果有供試品和無供試品測得的鱟試劑靈敏度（λc）在0.5～2.0λ（包括0.5λ和2.0λ）時，則認為供試品在該濃度下不干擾試驗，否則需要進行適當處理后重復(fù)本試驗。使用更靈敏的鱟試劑，對供試品進行更大的倍數(shù)稀釋，是排除干擾的簡單有效方法。 2.1.4 供試品 2.1.4.1 抗凝劑 取原液作160倍稀釋后測定。原液細菌內(nèi)毒素含量應(yīng)≤5.56EU/ml。 2.1.4.2 采血漿器及分血漿器 取1.2項流過液測定。細菌內(nèi)毒素含量應(yīng)≤0.5EU/ml。 2.1.4.3 分血漿袋 取1.3項清洗液測定。細菌內(nèi)毒素含量應(yīng)≤0.5EU/ml。 2.2 方法 取裝有0.1ml鱟試劑溶液的10×75mm試管（或0.1ml/支規(guī)格的鱟試劑原安瓿）4支，其中2支加入0.1ml供試品作為供試管，1支加入2λ內(nèi)毒素工作標準品溶液0.1ml作為陽性對照管，1支加入細菌內(nèi)毒素檢查用水0.1ml作為陰性對照管。將試管中溶液輕輕混勻后，封閉管口，垂直放入37±1℃水浴中，保溫60±2分鐘。保溫和拿取試管過程應(yīng)避免受到振動造成假陰性結(jié)果。 2.3 結(jié)果判定 將試管從水浴中輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn)180°時，管內(nèi)凝膠不變形，不從管壁滑脫者為陽性，記錄為（ ）；凝膠不能保持完整并從管壁滑脫者為陰性，記錄為（-）。供試品兩管均為（-）應(yīng)認為符合規(guī)定；如兩管均為（ ），應(yīng)認為不符合規(guī)定；如兩管中1管為（ ），1管為（-），按上述方法另取4管供試品管復(fù)試，4管中有1管為（ ），即認為不符合規(guī)定。陽性對照為（-）或陰性對照為（ ），試驗無效 |
2樓2009-09-24 18:39:30
yinguang
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4樓2009-10-10 13:33:16
5樓2009-10-10 14:38:05
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