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茚三酮顯色測氨基酸含量 已有20人參與
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最近在做茚三酮測氨基酸含量實驗,在做標(biāo)準(zhǔn)曲線時,連做了三次,發(fā)現(xiàn)每次結(jié)果都不一樣,而且吸光度也不是線性(顯色后顏色和濃度也不成比例)。我用亮氨酸做的,濃度梯度為0.06---0.3umol/ml. 茚三酮試劑(1g茚三酮溶于50ml95%乙醇),緩沖液用的pH5.4的2M醋酸緩沖液。反應(yīng)時加標(biāo)準(zhǔn)液后,再加1ml緩沖液,1ml茚三酮,水浴15min,冷卻靜置5min后,加3ml60%乙醇,570nm比色。結(jié)果顯色后有的沒變色(仍為黃色),有的為藍(lán)色,但是顏色和濃度不成比例。不知道哪出的問題?懇請各位做過相關(guān)實驗的給點(diǎn)指導(dǎo)意見,謝謝了! [ Last edited by 350784478 on 2009-9-25 at 10:51 ] |

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