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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 蛋白/酶 » 茚三酮顯色測氨基酸含量
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oase金蟲 (小有名氣)
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[交流]
茚三酮顯色測氨基酸含量 已有20人參與
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最近在做茚三酮測氨基酸含量實驗，在做標準曲線時，連做了三次，發(fā)現(xiàn)每次結果都不一樣，而且吸光度也不是線性（顯色后顏色和濃度也不成比例）。我用亮氨酸做的，濃度梯度為0.06---0.3umol/ml. 茚三酮試劑（1g茚三酮溶于50ml95%乙醇），緩沖液用的pH5.4的2M醋酸緩沖液。反應時加標準液后，再加1ml緩沖液，1ml茚三酮，水浴15min,冷卻靜置5min后，加3ml60%乙醇，570nm比色。結果顯色后有的沒變色（仍為黃色），有的為藍色，但是顏色和濃度不成比例。不知道哪出的問題？懇請各位做過相關實驗的給點指導意見，謝謝了！ [ Last edited by 350784478 on 2009-9-25 at 10:51 ] |
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