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xiaoye0927木蟲 (正式寫手)
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[交流]
【求助】壓力室 已有1人參與
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請(qǐng)問(wèn)有誰(shuí)用過(guò)壓力室?什么牌子?什么型號(hào)的? 可以交流一下嗎?謝謝 PS, 我需要對(duì)根部加壓,這里介紹的壓力室,是離體取樣的,不是我需要的。。。 請(qǐng)問(wèn)還有別的么?對(duì)整株加壓的,麻煩l了 [ Last edited by xiaoye0927 on 2010-4-4 at 20:42 ] |
木蟲 (正式寫手)
榮譽(yù)版主 (著名寫手)
鐵桿木蟲 (著名寫手)

木蟲 (正式寫手)
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多年以前寫了一個(gè)壓力室應(yīng)用說(shuō)明: 壓力室法測(cè)定水勢(shì)的注意事項(xiàng) by Z.W. Dai 按:用壓力室已經(jīng)很有“經(jīng)驗(yàn)”了,其實(shí)現(xiàn)在想想用“經(jīng)歷”更合適。大學(xué)的實(shí)驗(yàn)課上學(xué)到如何應(yīng)用,后來(lái)研究生階段論文是關(guān)于水分脅迫的,壓力室用了很久。直到最近再次做水分脅迫的實(shí)驗(yàn)時(shí),一位老師目睹了我的測(cè)量過(guò)程,然后委婉的提出一點(diǎn)建議。當(dāng)時(shí)我并沒有放在心上,覺得有點(diǎn)小題大作。后來(lái)便讀到了這篇綜述 (Turner, 1988,Irrigation Science),我開始臉紅起來(lái)。今天上午在網(wǎng)上查了一下相關(guān)的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),以及儀器應(yīng)用介紹,無(wú)疑很多注意事項(xiàng)并沒有被廣泛的提及(限于我所看到的資料而言)。所以,將一些要點(diǎn)摘錄下來(lái),一來(lái)備忘,同時(shí)說(shuō)說(shuō)自己的想法。 壓力室法的工作原理: 記得我上試驗(yàn)課的時(shí)候?qū)@一部分總是心懷畏懼,老師多講一點(diǎn)便有些抱怨,‘我又不是開發(fā)儀器的,只要告訴我這個(gè)儀器能夠測(cè)定什么,怎么測(cè)定就完了,簡(jiǎn)單明了!’,F(xiàn)在想想這種想法是自己思考惰性在發(fā)揮作用,F(xiàn)在教科書或?qū)嶒?yàn)指導(dǎo)中壓力室法的工作原理大多數(shù)情況下只有簡(jiǎn)單的文字描述,但是須知每一種儀器工作時(shí)都有它的理論前提,如果應(yīng)用這個(gè)方法的前提不成立了,還繼續(xù)應(yīng)用它,無(wú)疑會(huì)產(chǎn)生誤導(dǎo)的結(jié)論。 壓力室法測(cè)定得到的值實(shí)際上是質(zhì)外體的基質(zhì)勢(shì)(the matric potential of the apoplast), 它與總水勢(shì)(total water potential)相等或相似的前提是 1)質(zhì)外體與相鄰共質(zhì)體之間的液體交流阻力很小,它們之間可以迅速達(dá)到平衡;2)質(zhì)外體滲透勢(shì)接近于0 。對(duì)于1)基本上在大多數(shù)植物中是成立的;而第二個(gè)前提條件便并非總是成立,特別是在一些果實(shí)(葡萄,草莓等)以及特殊植物的葉片中,質(zhì)外體溶液濃度可以達(dá)到700mM, 其滲透勢(shì)遠(yuǎn)遠(yuǎn)與零偏離。如果此時(shí)仍然采用壓力室法,無(wú)疑會(huì)產(chǎn)生諸多誤導(dǎo)結(jié)果。關(guān)于質(zhì)外體溶質(zhì)含量的問(wèn)題已經(jīng)引起很多植物生理學(xué)家的注意,但是目前還沒有明確的理論表述(搜索apoplastic solute可以看到相關(guān)進(jìn)展)。因此在果實(shí)水勢(shì)測(cè)定過(guò)程中,方法的選擇便有些讓人頭疼。最好的選擇當(dāng)然是壓力探針,但是那個(gè)儀器昂貴,難于操作,限制了它的廣泛應(yīng)用;其它的熱電偶法,也因?yàn)槭軠囟扔绊戄^大,平衡時(shí)間長(zhǎng)而需要特別小心。 好了言歸正傳,壓力室法操作過(guò)程中需要注意的一些地方: 1)盡量減少取樣與測(cè)量過(guò)程中被測(cè)量樣品的蒸騰失水,尤其是在植物蒸騰速率很大的情況下(如中午水勢(shì)測(cè)定)。取樣后即使少量的水分散失也會(huì)導(dǎo)致大幅度的水勢(shì)下降?纯催@些數(shù)字就明白了:Turner 和Long的研究表明,對(duì)于蒸騰速率很高的葉片,在取樣后最初20s內(nèi)的水分散失可以導(dǎo)致水勢(shì)降低0.7MPa。(太恐怖了吧,這個(gè)變化足以把處理效果掩蓋!)。為減少?gòu)娜拥綔y(cè)定過(guò)程中的水分散失,測(cè)定樣品從植株上切離之前需先用塑料袋包裹。(這就是那位老師給我的建議,目前我測(cè)定的是葡萄葉片水勢(shì))。據(jù)美國(guó)一位擁有至少5000片葡萄葉片水勢(shì)測(cè)定經(jīng)驗(yàn)的教授Mark Greenspan介紹,葡萄葉片切離前包裹與不包裹可以導(dǎo)致0.2-0.3MPa 的水勢(shì)差別(http://www.microirrigationforum.com/new/archives/glwpg.html)。所以我現(xiàn)在測(cè)定的時(shí)候便首先將葉片用塑料袋套住,然后切離測(cè)定。 2)測(cè)定葉片表面不要有水珠,因?yàn)樗麄兛梢蕴岣咚畡?shì)0.1 –0.2 MPa。 3)樣品不要二次切割,因?yàn)槎吻懈钅軌驅(qū)е抡`差,其原因尚不清楚。坦白講我之前用壓力室的時(shí)候每次都是二次切割的!甚至在某些儀器應(yīng)用的說(shuō)明書上也標(biāo)明如果切口不平滑,需要重新切割?梢娺@個(gè)建議值得考慮。但是我知道如何在第一次切割的時(shí)候做到平滑還需要些技巧和練習(xí)。我現(xiàn)在用的是醫(yī)用手術(shù)刀,非常鋒利,可以一次到位。 4)測(cè)量樣品要盡量少的露出壓力室,能清楚觀察切面即可。如果外露太多,從壓力室內(nèi)樣品擠壓出的水分被用來(lái)填充壓力室外樣品中的自由空間,導(dǎo)致測(cè)量誤差。 5)加壓要緩慢,以每秒0.025 MPa為宜。加壓初期可以稍快,但是近平衡點(diǎn)的時(shí)候一定要緩慢。這點(diǎn)倒是在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)中均已經(jīng)指出,可惜我沒有看到數(shù)量性的描述。如果只有“緩慢”加壓的描述,是很難準(zhǔn)確理解其含義的,因?yàn)椴恢朗裁词蔷徛,不知道如何定義迅速。而這種籠統(tǒng)地介紹大概源于大多數(shù)壓力室的簡(jiǎn)易,控制壓力并非易事,所以只好跟著感覺做了,F(xiàn)在用的這個(gè)壓力室有一個(gè)壓力感器,通過(guò)數(shù)字顯示屏顯示壓力,而且壓力控制閥依次有4個(gè)之多,可以比較容易的控制加壓速度。 6)平衡點(diǎn)的確認(rèn)。這個(gè)每個(gè)用過(guò)壓力室的都知道,不再多說(shuō)。 至于應(yīng)用過(guò)程中的安全注意事項(xiàng),大多數(shù)介紹中均已經(jīng)涉及,也不多說(shuō)。 文字均編譯自Turner, N. C. (1988). "Measurement of plant water status by the pressure chamber technique." Irrigation Science 9: 289-308. 需要全文者可留下郵箱。歡迎意見和討論,希望一起提高。 (轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處,多謝) |

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