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xiaoye0927專家顧問
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[交流]
【求助】壓力室 已有1人參與
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請問有誰用過壓力室？什么牌子？什么型號的？ 可以交流一下嗎？謝謝 PS, 我需要對根部加壓，這里介紹的壓力室，是離體取樣的，不是我需要的。。。 請問還有別的么？對整株加壓的，麻煩l了 [ Last edited by xiaoye0927 on 2010-4-4 at 20:42 ] |
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多年以前寫了一個壓力室應用說明: 壓力室法測定水勢的注意事項 by Z.W. Dai 按：用壓力室已經(jīng)很有“經(jīng)驗”了,其實現(xiàn)在想想用“經(jīng)歷”更合適。大學的實驗課上學到如何應用，后來研究生階段論文是關于水分脅迫的，壓力室用了很久。直到最近再次做水分脅迫的實驗時，一位老師目睹了我的測量過程，然后委婉的提出一點建議。當時我并沒有放在心上，覺得有點小題大作。后來便讀到了這篇綜述 （Turner, 1988，Irrigation Science），我開始臉紅起來。今天上午在網(wǎng)上查了一下相關的實驗指導，以及儀器應用介紹，無疑很多注意事項并沒有被廣泛的提及（限于我所看到的資料而言）。所以，將一些要點摘錄下來，一來備忘，同時說說自己的想法。 壓力室法的工作原理： 記得我上試驗課的時候對這一部分總是心懷畏懼，老師多講一點便有些抱怨，‘我又不是開發(fā)儀器的，只要告訴我這個儀器能夠測定什么，怎么測定就完了，簡單明了！’�，F(xiàn)在想想這種想法是自己思考惰性在發(fā)揮作用�，F(xiàn)在教科書或實驗指導中壓力室法的工作原理大多數(shù)情況下只有簡單的文字描述，但是須知每一種儀器工作時都有它的理論前提，如果應用這個方法的前提不成立了，還繼續(xù)應用它，無疑會產(chǎn)生誤導的結論。 壓力室法測定得到的值實際上是質外體的基質勢（the matric potential of the apoplast）, 它與總水勢（total water potential）相等或相似的前提是 1）質外體與相鄰共質體之間的液體交流阻力很小，它們之間可以迅速達到平衡；2）質外體滲透勢接近于0 。對于1）基本上在大多數(shù)植物中是成立的；而第二個前提條件便并非總是成立，特別是在一些果實（葡萄，草莓等）以及特殊植物的葉片中，質外體溶液濃度可以達到700mM, 其滲透勢遠遠與零偏離。如果此時仍然采用壓力室法，無疑會產(chǎn)生諸多誤導結果。關于質外體溶質含量的問題已經(jīng)引起很多植物生理學家的注意，但是目前還沒有明確的理論表述（搜索apoplastic solute可以看到相關進展）。因此在果實水勢測定過程中，方法的選擇便有些讓人頭疼。最好的選擇當然是壓力探針，但是那個儀器昂貴，難于操作，限制了它的廣泛應用；其它的熱電偶法，也因為受溫度影響較大，平衡時間長而需要特別小心。 好了言歸正傳，壓力室法操作過程中需要注意的一些地方： 1）盡量減少取樣與測量過程中被測量樣品的蒸騰失水，尤其是在植物蒸騰速率很大的情況下（如中午水勢測定）。取樣后即使少量的水分散失也會導致大幅度的水勢下降�？纯催@些數(shù)字就明白了：Turner 和Long的研究表明，對于蒸騰速率很高的葉片，在取樣后最初20s內的水分散失可以導致水勢降低0.7MPa。(太恐怖了吧，這個變化足以把處理效果掩蓋！)。為減少從取樣到測定過程中的水分散失，測定樣品從植株上切離之前需先用塑料袋包裹。（這就是那位老師給我的建議，目前我測定的是葡萄葉片水勢）。據(jù)美國一位擁有至少5000片葡萄葉片水勢測定經(jīng)驗的教授Mark Greenspan介紹，葡萄葉片切離前包裹與不包裹可以導致0.2-0.3MPa 的水勢差別（http://www.microirrigationforum.com/new/archives/glwpg.html）。所以我現(xiàn)在測定的時候便首先將葉片用塑料袋套住，然后切離測定。 2）測定葉片表面不要有水珠，因為他們可以提高水勢0.1 –0.2 MPa。 3）樣品不要二次切割，因為二次切割能夠導致誤差，其原因尚不清楚。坦白講我之前用壓力室的時候每次都是二次切割的！甚至在某些儀器應用的說明書上也標明如果切口不平滑，需要重新切割。可見這個建議值得考慮。但是我知道如何在第一次切割的時候做到平滑還需要些技巧和練習。我現(xiàn)在用的是醫(yī)用手術刀，非常鋒利，可以一次到位。 4）測量樣品要盡量少的露出壓力室，能清楚觀察切面即可。如果外露太多，從壓力室內樣品擠壓出的水分被用來填充壓力室外樣品中的自由空間，導致測量誤差。 5）加壓要緩慢，以每秒0.025 MPa為宜。加壓初期可以稍快，但是近平衡點的時候一定要緩慢。這點倒是在大多數(shù)實驗指導中均已經(jīng)指出，可惜我沒有看到數(shù)量性的描述。如果只有“緩慢”加壓的描述，是很難準確理解其含義的，因為不知道什么是緩慢，不知道如何定義迅速。而這種籠統(tǒng)地介紹大概源于大多數(shù)壓力室的簡易，控制壓力并非易事，所以只好跟著感覺做了�，F(xiàn)在用的這個壓力室有一個壓力感器，通過數(shù)字顯示屏顯示壓力，而且壓力控制閥依次有4個之多，可以比較容易的控制加壓速度。 6）平衡點的確認。這個每個用過壓力室的都知道，不再多說。 至于應用過程中的安全注意事項，大多數(shù)介紹中均已經(jīng)涉及，也不多說。 文字均編譯自Turner, N. C. (1988). "Measurement of plant water status by the pressure chamber technique." Irrigation Science 9: 289-308. 需要全文者可留下郵箱。歡迎意見和討論，希望一起提高。 （轉載請注明出處，多謝） |
5樓2010-03-31 04:41:18
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SKPM1400/80數(shù)字式壓力室，通過對壓力室中植物樣品（葉片或枝條）進行氣體加壓，觀察第一滴組織液滲出時的壓力來測量植物水勢。 一．系統(tǒng)組成  設備組裝圖 1． 主設備（已經(jīng)連接導氣管）  包括壓力室，高壓蓋，導氣管接口，壓力室控制開關，流量閥，顯示屏，電源開關，量程開關，顯示控制按鈕。 平時，請將高壓頭放置在左邊的底座上，擰牢固；關閉電源開關（節(jié)省電池）；壓力室控制開關打到“OFF”位置。注意保持面板的清潔。 2． 氣瓶（連接調壓器和導氣管）  氣瓶為原廠進口，接口與國內的標準不一致，但在一般大一些的氣站均可充氣。（一般分為英制接口和公制接口，國內采用的公制接口較多，如需采用公制接口充氣，則需要購買一英制接口轉公制接口的轉換器）氣體類型：一般的氮氣或者純氮氣。（廠家的氣瓶一般是不能站立的，需要在底部加一個托才能讓其站立起來）。 氣瓶直接連接調壓器，接法見：氣瓶和調壓器的使用。（見上圖） 3． 調壓器 [img]http://pic.www.gaoyang168.com/201003/30/311515_2010330092944.jpg[/img 調壓器連接氣瓶和導氣管，如上圖所表示，它有兩個壓力表，一個顯示氣瓶中氣壓值，一個顯示輸出氣壓值。調壓器的控制閥在上面，順時針下擰打開調壓器，逆時針上擰關閉氣體輸出。 二．控制系統(tǒng)說明 1．壓力室氣體控制 該控制旋鈕有三個位置：“Fill Chamber”（充氣），“Vent Chamber”（排氣），“OFF”（關閉）。當旋鈕旋到“充氣”位置，氣體可以通過流量閥流入壓力室，這個操作在充氣測量時使用；旋到“OFF”位置，氣體不再流入和流出壓力室，即壓力室內氣體的壓力不再變化，這個操作用于測量結果出現(xiàn)時（觀察到第一滴液滴出現(xiàn)）；旋到“排氣”位置 將氣體排出壓力室，完成一次測量。(注意：不僅要排放掉壓力室內的氣體，還需排放掉導氣管內的氣體，具體做法在拆除系統(tǒng)中有說明) 2． 流量閥 這個旋鈕控制流入壓力室的氣體流量。順時針可以減小流量。在開始測量時它應該是關閉的，應注意不要擰的太緊，它不應該作為開關閥門來使用。測量開始后，慢慢增大流量（逆時針向上），直至達到所需要的流量。 3． 電源開關 用于給電路供電，注意：不用時關閉電源以節(jié)約電能。 4．測量量程開關 用于設定儀器顯示測量結果的范圍。一般選擇0－20Bar，可以保證有0.01Bar的精度。如果測量結果會超過了此量程，可以設定更高的0-200Bar。顯示數(shù)值超過量程不會對設備有什么損害。 4． 顯示控制 此控制包括兩個按鈕：“Hold“，“Free”。當按下“Hold”時，顯示的讀數(shù)不再變化，直到按下“Free”按鈕為止，此操作用于當結果出現(xiàn)時，以便記錄讀數(shù)。按下“Free”，顯示當前的測量結果。 5． 調零 此控制用于校正儀器氣壓表的零反饋。如果壓力室和大氣連通時，氣壓表的讀數(shù)不為零，例如為0.6 Bar，那么所有的測量結果都會在原來的基礎上加上這個0.6Bar，因此會造成測量的不準確。為避免這種情況的發(fā)生，在關閉壓力室前應該檢查一下氣壓表的讀數(shù)是否為零，否則使用此控制，使讀數(shù)為零。 6． 電池 該系統(tǒng)使用的電池為自帶的PP3型9v 不可充電電池，可以連續(xù)工作30個小時�？梢赃x用充電電池。電路如果檢測到電池的電壓下降到6.9v 便會顯示低電壓告警。 二． 操作 首先，準備好氣瓶，并注意檢查閥門是關著的，然后連接氣瓶和系統(tǒng)。檢查導氣管以及其它各部分連接是否良好。 將儀器上的壓力室氣體控制閥門旋到“OFF”位置，同時將流量閥門關閉（順時針擰，不要擰的過緊，以免損壞）。連接儀器和氣瓶。調節(jié)調壓器上的閥門使之可以傳送所要求的最大壓力的氣體。（詳見氣瓶和調壓器的使用） 數(shù)字式 首先檢查氣壓計的零值。給儀器安裝上電池并開啟，設定測量量程為0-20Bar，按下“display hold”按鈕，然后調節(jié)“set zero” 氣壓計電位計，這個讀數(shù)應該不變；接下來按下“display free”按鈕，氣壓計讀數(shù)應該立即跳變，將壓力室氣體控制按鈕旋到“vent chamber”位置，使壓力室和外界大氣連通，并達到平衡，調節(jié)“set zero”電位計使之顯示零值。 注意：此調節(jié)過程必須在測量量程0-20bar下。否則會不準，精度不夠。 調零后，再將測量量程打到工作所需量程。并使讀數(shù)顯示狀態(tài)在“display free”下。 指針式 也是檢查紅色指針的零值。調節(jié)刻度盤相應的按鈕使之歸零。（莖干的插入如下圖）  以下操作是二者共同使用的： 測量之前將壓力室氣體控制按鈕打到“vent chamber”位置。 將樣品的葉子放入塑料袋以阻止水分的流失。用刀片或者解剖刀在樹枝傷口處削一個切口。通過壓力頭將它放入壓力室。 有兩種壓力頭可以選擇。第一種（也是最常用的）高壓頭使用三個墊片，如下圖所示。它比較適合木質樣品。第二種示低壓頭使用一個墊片（如下圖所示），這個墊片的孔徑等于或者略大于樣品的直徑。如果樣品示木質的，最好使用橡膠墊片，可以和它結合的比較緊密。  高壓頭 高壓頭里原廠來的中心是密封的橡膠圈，需要用戶根據(jù)自己的需要尺寸穿孔。（穿孔的辦法為：1. 用一個圓錐刀在實心的橡膠圈的中心慢慢鑿開一個適合于植物莖干或葉片直徑大小的孔 2. 把一特細的實心錘放置于實心橡膠圈的中心，然后用一錘子慢慢砸出一個適合于植物莖干或葉片直徑大小的孔）所有上面用到的工具需要用戶自己購買 如果所選的植物的莖干或葉片的直徑大小與配套的帶孔的橡膠片的直徑相當（有各種不同規(guī)格的直徑）首先，需要把鑲在氣壓蓋上的實心的橡膠墊片取下：可以用一尖針把它挑出來。然后，在取下實心橡膠墊片的地方安上帶孔的橡膠墊片（根據(jù)用戶自己所選的直徑孔）。最后安上其它的墊片就可以  低壓頭 木質樣品使用高壓頭 高壓頭適合壓力范圍0-80 bar的所有測量。 高壓頭由三種墊片組成，先選擇一個橡膠墊片。最底部是一個金屬墊片。這種金屬墊片有許多不同的孔徑適合于不同的橡膠墊片，選擇的標準是它的孔徑大于所選擇的橡膠墊片，這樣的墊片會給最大的壓力又不會擠壓樣品枝莖。將橡膠墊片置于它的上部。 選擇一個塑料墊片置于橡膠墊片的上部。它的尺寸選擇要求比橡膠墊片的直徑略大一毫米左右。這樣它會給橡膠墊片足夠的壓力以阻止其膨脹。 三種墊片的排列順序很重要，請按照上述的步驟或者參照圖形排列。然后，將樣品穿過墊片。 肉質樣品使用低壓頭 這種低壓頭適合的壓力范圍是0-40bar。如果壓力超過此范圍請使用高壓頭。 這種頭僅僅需要一個橡膠墊片。理想的墊片的孔徑會比樣品的枝莖略大。 測量 首先清除容器O型圈的污垢，并固定其位置。將套有塑料袋的樣品放入壓力室，將蓋子旋入基座。注意擰的時候不要太用力。如果不能旋入，可以先旋出1/2或者1/4然后再旋入。 測量之前，給蓋子安裝上安全保護裝置（那透明的塑料盒）。這個操作很重要，因為如果高壓頭或者低壓頭安裝不合要求，植物可能會被氣流沖出壓力室。有了這個裝置，你也可以觀察露在外面的植物切口情況來判斷安裝是否合乎要求。 打開氣瓶閥門到小一點的位置，再打開調壓器上的控制閥，調節(jié)輸出壓力表指針到一個合適的壓力（比如0-20bar）, 如果壓力不夠，可再調大一點氣瓶閥門，再調調壓器上的控制閥，直到指示您需要的壓力， 將壓力室氣體控制旋鈕打到“fill chamber”位置，慢慢打開流量閥，會聽到微弱的氣流流入壓力室的聲音。觀察顯示的壓力讀數(shù)，而注意力應集中到樣本的切口處。 如果使用數(shù)字式測量，將一個手指放在“display hold”上面，逆時針旋動流量閥會增大氣體的流量。當切口上出現(xiàn)第一滴液滴時，按下“display hold”按鈕，然后將壓力室上的氣體控制旋鈕打到“off”位置。 如果使用指針式測量，逆時針旋動流量閥會增大氣體的流量。當切口上出現(xiàn)第一滴液滴時，然后將壓力室氣體控制旋鈕打到“off”位置，紅色的指針會指向最大的壓力值。 使用放大鏡或者低倍顯微鏡觀察莖或者葉柄切口，目的在于尋找切口表面的液滴。當植物受到的壓力等于木質的水勢時便會出現(xiàn)，當看到切口表面變黯而且反光時，關閉氣體供應(將壓力室氣體控制旋鈕打到OFF)，記下此刻的氣壓讀數(shù)顯示（或者在數(shù)字系統(tǒng)中按下”display hold”，當一按下這按鈕時，數(shù)字顯示屏上的讀數(shù)就不變，以便記下此刻的讀數(shù)）。 如果要重復測量以確定此刻的壓力，則要先把壓力室中的氣體放掉一部分使氣壓低于第一滴液滴出現(xiàn)時的壓力。慢慢地將氣體開關打向“vent chamber”位置，注意要慢慢地進行。只要放掉一小部分氣體就行了，然后將氣體開關打到“off”位置，重復測量過程。 測量完成后，在取走樣品之前，要將壓力室的壓力恢復到大氣壓。將壓力室氣體控制旋鈕慢慢地打向“vent chamber”位置，直到可以聽到氣體放出的聲音，不要完全打到這個位置，避免氣流過大，溫度變化過大造成測量不準確。氣體放完后，旋出蓋子，取出樣品，準備下一個樣品的測量。 整個測量結束后，收起設備，同時導氣管中的氣體也要排放出。在最后一個樣品取出之前，關閉氣瓶上的開關。這時將導氣管中的氣體充入壓力室，然后再放掉，這個過程要重復幾次，直至和大氣壓平衡。不要使用將壓力室上的蓋子擰下來的方法放導氣管中的氣體，這樣會產(chǎn)生小微粒，碎片等，還有可能吹傷操作者眼睛。 這個過程結束后，便可以拆卸導氣管，龍頭，氣瓶了 。如果使用的是數(shù)字系統(tǒng)，不要忘記關閉電源。 氣瓶和調壓器的使用 系統(tǒng)安裝 1． 將導氣管安裝到調壓器上，用力擰緊。 2． 將O型墊片墊在氣瓶閥出氣口上。 3． 使用A型夾將調壓器連接到氣瓶閥上。 4． 在系統(tǒng)端，將壓力室氣體控制旋鈕（黑旋鈕）打到“OFF”位置，流量閥關閉（順時針是關閉，注意不要擰的太緊）。 5． 用導氣管連接器將導氣管連接到系統(tǒng)的氣體入口上。（具體做法：往上拉出金屬彈片， 把金屬頭放置到壓力室的入氣口上，然后松手，這樣就緊固好了接口）  操作 1． 在系統(tǒng)端，壓力室氣體控制旋鈕打到“OFF”位置，流量閥關閉。 2． 檢查導氣管，調壓器，氣瓶之間的連接是否完好 3． 逆時針旋轉調壓器的閥門，使之完全關閉。 4． 逆時針旋轉氣瓶上的閥門，一個刻度盤上會顯示氣瓶中氣體的壓力值。如果這個值沒有達到工作值，就需要重新充氣了 。 5． 順時針慢慢打開調壓器上的閥門，直到第二個刻度盤顯示系統(tǒng)工作的最大氣壓。 例如：一植物的水勢所需的最大壓力為40BAR，所以第二個刻度盤顯示的讀數(shù)不應超過40BAR 6． 在系統(tǒng)端，壓力室放入O型墊片，插入植物樣本，蓋上氣壓蓋。 7． 如果需要校正零值，氣體主控開關打到“fill chamber”位置。 8． 慢慢地打開流量閥（逆時針上擰），開始充氣直至出現(xiàn)第一滴液滴。 拆除系統(tǒng) 1． 在系統(tǒng)端，關閉流量閥（慢慢地順時針旋轉），但不能擰的太緊，因為不能把其當作開關閥來使用。 2． 慢慢地把壓力室氣體控制旋鈕旋到“vent chamber”（放氣）位置，放出氣體。卸下壓力室頭，同時可以聽到“嘶嘶”的排氣聲。 3． 在調壓器和導氣管中仍存在著高壓氣體。在拆除設備之前，必須放掉這部分氣體。 4． 順時針方向關閉氣瓶上的閥門。 5． 將壓力室氣體控制旋鈕重新旋到“fill chamber”（充氣）位置。 6． 慢慢地打開流量閥，（逆時針上擰）讓剩余的高壓氣體流入開放的壓力室，直到兩個壓力表讀數(shù)均為零。 7． 完全關閉調壓器上的閥門（逆時針）。 經(jīng)過以上步驟后，整套系統(tǒng)裝置就可以安全地拆除。 [ Last edited by xiaowuhehe on 2010-3-30 at 09:33 ] |
4樓2010-03-30 09:24:52
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