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[交流]
【求助/交流】求助有關(guān)高通量篩選育種方面的PPT，文獻(xiàn) 已有5人參與
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如題 最近需要做這個(gè)PPT應(yīng)付考試，但本人是做藥的，對(duì)生物，特別是對(duì)高通量篩選育種技術(shù)真不是很懂，有的話請(qǐng)投這個(gè)郵箱oliverxzj@163.com. |
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85715623
木蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 病原細(xì)菌與放線菌生物學(xué)
藥物高通量篩選技術(shù)
oliverxzj(金幣+6):謝謝支持，已經(jīng)查到了一些文獻(xiàn)，但還是要謝謝大力支持 2010-04-24 10:12
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一.概念 高通量篩選(High throughput screening，HTS)技術(shù)是指以分子水平和細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)方法為基礎(chǔ)，以微板形式作為實(shí)驗(yàn)工具載體，以自動(dòng)化操作系統(tǒng)執(zhí)行試驗(yàn)過(guò)程，以靈敏快速的檢測(cè)儀器采集實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)，以計(jì)算機(jī)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，同一時(shí)間對(duì)數(shù)以千萬(wàn)樣品檢測(cè)，并以相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫(kù)支持整個(gè)體系運(yùn)轉(zhuǎn)的技術(shù)體系。 二. 高通量篩選技術(shù)體系的組成 1. 化合物樣品庫(kù) 化合物樣品主要有人工合成和從天然產(chǎn)物中分離純化兩個(gè)來(lái)源。其中,人工合成又可分為常規(guī)化學(xué)合成和組合化學(xué)合成兩種方法。 2.自動(dòng)化的操作系統(tǒng) 自動(dòng)化操作系統(tǒng)利用計(jì)算機(jī)通過(guò)操作軟件控制整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程。操作軟件采用實(shí)物圖像代表實(shí)驗(yàn)用具，簡(jiǎn)潔明了的圖示代表機(jī)器的動(dòng)作。自動(dòng)化操作系統(tǒng)的工作能力取決于系統(tǒng)的組分，根據(jù)需要可配置加樣、沖洗、溫解、離心等設(shè)備以進(jìn)行相應(yīng)的工作。 3.高靈敏度的檢測(cè)系統(tǒng) 檢測(cè)系統(tǒng)一般采用液閃計(jì)數(shù)器、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)計(jì)數(shù)器、寬譜帶分光光度儀、熒光光度儀等。 4.數(shù)據(jù)庫(kù)管理系統(tǒng) 數(shù)據(jù)庫(kù)管理系統(tǒng)承擔(dān)4個(gè)方面的功能: 樣品庫(kù)的管理功能;生物活性信息的管理功能; 對(duì)高通量藥物篩選的服務(wù)功能; 藥物設(shè)計(jì)與藥物發(fā)現(xiàn)功能。 三. 高通量篩選模型 常用的篩選模型都在分子水平和細(xì)胞水平，觀察的是藥物與分子靶點(diǎn)的相互作用，能夠直接認(rèn)識(shí)藥物的基本作用機(jī)制。 1. 分子水平的藥物篩選模型:受體篩選模型;酶篩選模型;離子通道篩選模型 1.1受體篩選模型:指受體與放射性配體結(jié)合模型。以受體為作用靶的篩選方法,包括檢測(cè)功能反應(yīng)、第二信使生成和標(biāo)記配體與受體相互作用等不同類型。 1.2酶篩選模型:觀察藥物對(duì)酶活性的影響。根據(jù)酶的特點(diǎn),酶的反應(yīng)底物,產(chǎn)物都可以作為檢測(cè)指標(biāo),并由此確定反應(yīng)速度。典型的酶篩選包括  1) 適當(dāng)緩沖液中孵化;(2)控制反應(yīng)速度,如:溫度,緩沖液的pH值和酶的濃度等;(3)單時(shí)間點(diǎn)數(shù)器, 需測(cè)量產(chǎn)物的增加和底物的減少。1.3離子通道篩選模型: (1)貝類動(dòng)物毒素的高通量篩選,其作用靶為Na+通道上的蛤蚌毒素結(jié)合位點(diǎn)，用放射性配體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)考察受試樣品。(2)用酵母雙雜交的方法高通量篩選干擾N型鈣通道β3亞單位與α1β亞單位相互作用的小分子，尋找新型鈣通道拮抗劑。 2.細(xì)胞水平藥物篩選模型 觀察被篩樣品對(duì)細(xì)胞的作用,但不能反映藥物作用的具體途徑和靶標(biāo),僅反映藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)等過(guò)程的綜合作用。包括: 內(nèi)皮細(xì)胞激活; 細(xì)胞凋亡; 抗腫瘤活性; 轉(zhuǎn)錄調(diào)控檢測(cè); 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路; 細(xì)菌蛋白分泌; 細(xì)菌生長(zhǎng)。 四.問(wèn)題及展望 高通量篩選技術(shù)與傳統(tǒng)的藥物篩選方法相比有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):反應(yīng)體積小；自動(dòng)化；靈敏快速檢測(cè)；高度特異性。但是，高通量篩選作為藥物篩選的一種方法,并不是一種萬(wàn)能的手段，特別是在中藥研究方面，其局限性也是十分明顯的。首先，高通量篩選所采用的主要是分子、細(xì)胞水平的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ�，因此任何模型都不可能充分反映藥物的全面藥理作用；其次，用于高通量篩選的模型是有限的和不斷發(fā)展的，要建立反映機(jī)體全部生理機(jī)能或藥物對(duì)整個(gè)機(jī)體作用的理想模型，也是不現(xiàn)實(shí)的。但我們應(yīng)該相信，隨著對(duì)高通量篩選研究的不斷深入，隨著對(duì)篩選模型的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、新的藥物作用靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)以及篩選模型的新穎性和實(shí)用性的統(tǒng)一，高通量篩選技術(shù)必將在未來(lái)的藥物研究中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。 |
3樓2010-04-24 08:25:05
頂 |
2樓2010-04-23 23:30:06
6樓2012-06-06 20:00:20
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